KLH偶联多肽定制技术

KLH（Keyhole Limpet Hemocyanin，钥孔鱼血蓝蛋白） ;是一种高免疫原性的大分子蛋白，常作为多肽抗原载体应用于疫苗研发、抗体制备及免疫分析。通过将小分子肽段共价偶联至KLH上，可大幅提高其免疫原性，诱导机体产生特异性免疫应答。

1. 常用偶联策略

a. EDC/NHS缩合发生反应（胺-羧酸）凭借多肽上的氨基与KLH蛋白质上的羧基体现；惯用于具有赖氨酸残基或N末段胺的肽。b. 巯基-马来酰亚胺法多肽构建C末半胱氨酸（Cys），与马来酰亚胺体现的KLH反應；非特异聊天高，格局平稳，不影响力KLH主链作用。c. Click反响（节约于KLH，偶联使用率高但需反响状态提升）；

2. KLH类型与处理

原本KLH（Native KLH）：要用于免疫检测试验；KLH媒体化绘制型：如Succinylated-KLH、Maleimide-KLH；通常先碱化KLH，加个入肽段对其进行定项偶联；进行后进行透析或抽滤反渗透装置弄掉散布肽段。

3. 定制流程

生成含pc端-Cys的肽段或赖氨酸多肽；应用Sulfo-SMCC等热塑剂将KLH来马来酰亚胺化；参与偶联反响（清新具体条件，4℃阴凉）；透析纯化，HPLC或PAGE核验偶联工作效率；可出示偶联率（电机负载密度单位）检侧通知单。

4. 应用方向

免疫免疫抗体准备：如多肽抗原准备多克隆免疫免疫抗体（pAb）或单抗；预防针联合开发：如恶性肿瘤新抗原肽-KLH预防针；免疫验测验测标物：偶联肽用以ELISA包被抗原。

5. 定制选项

KLH媒体选择：Native KLH / Maleimide-KLH；偶联体积密度的控制（低/中/高）；支持系统与OVA/BSA比对偶联；可直接展示肽-HSA、肽-BSA等多承载旧版。

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