KLH偶联多肽定制技术

KLH（Keyhole Limpet Hemocyanin，钥孔鱼血蓝蛋白） 是一种高免疫原性的大分子蛋白，常作为多肽抗原载体应用于疫苗研发、抗体制备及免疫分析。通过将小分子肽段共价偶联至KLH上，可大幅提高其免疫原性，诱导机体产生特异性免疫应答。

1. 常用偶联策略

a. EDC/NHS缩合响应（胺-羧酸）采取多肽上的氨基与KLH球蛋白上的羧基生理反应；较常用于所含赖氨酸残基或N末段胺的肽。b. 巯基-马来酰亚胺法多肽引进C末半胱氨酸（Cys），与马来酰亚胺体现的KLH发生反应；特异形高，节构可靠，不的影响KLH主链功效。c. Click不良反馈（不要用于KLH，偶联生产率高但需不良反馈生活条件优化方案）；

2. KLH类型与处理

原始KLH（Native KLH）：要多用于免疫性测试；KLH的载体化遮盖型：如Succinylated-KLH、Maleimide-KLH；基本先碱化KLH，加个入肽段实现方向偶联；完工后进行透析或离心法超滤膜祛除解离肽段。

3. 定制流程

获得含PC版-Cys的肽段或赖氨酸多肽；实用Sulfo-SMCC等热塑剂将KLH实行马来酰亚胺化；来进行偶联生理反应（温顺具体条件，4℃背光）；透析纯化，HPLC或PAGE效验偶联高效率；可提供数据偶联率（额定负载容重）检查评估报告。

4. 应用方向

抗原阳性备制：如多肽抗原备制多克隆抗原阳性（pAb）或单抗；防疫针联合开发：如淋巴肿瘤新抗原肽-KLH防疫针；天然免疫的检测要求物：偶联肽主要用于ELISA包被抗原。

5. 定制选项

KLH媒体电机选型：Native KLH / Maleimide-KLH；偶联强度把握（低/中/高）；支撑与OVA/BSA比对偶联；可也出示肽-HSA、肽-BSA等多质粒传奇。

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