5-氨基乙酰丙酸（5-Aminolevulinic acid, 5-ALA） 不是种在菌物工程体内合出猩红素（heme）的前体团伙，实用在光驱动力中药中药治疗（Photodynamic Therapy, PDT）中，还是比较是用在肝癌与皮肤组织病的靶点疗法中药中药治疗。为着达到对其确定、按量、成相或靶点疗法递送的钻研意义，教学科研相关人员常对其采取荧光或亲和箭头，之中菌物工程素（Biotin）箭头不是种实用的亲和箭头管理策略。

以內为“5-ALA的生物学素标示（Biotinylation of 5-Aminolevulinic Acid）”的专业课程介绍书相关内容，有化学反应攻略 、制作而成指导思想、使用导向及需要注意项目。

一、图片背景讲解

5-ALA 都是种构成简单易行的非蛋白酶质酪氨酸，构成式为：

NH₂–CH₂–CO–CH₂–CH₂–COOH

它含有一两个个伯胺（NH₂）和一两个羧酸（COOH）官能团，所以说享有一段的催化装饰空间。

在食用的药物的开发、细胞膜摄入探究、PDT原理挑战等方面，对其实施微生物素化遮盖，有下面的益处：

适用于与链霉亲和素（streptavidin）平台依照；

保证生物富集、获取、靶向治疗递送；

可外源性接荧光检测器、纳米级的载体、金属材质检测器等；

使使用在生物技术素-亲和素增加系統的感应器判断。

二、耐腐蚀修饰语机制慨述

1. 标记符号位点使用

5-ALA有两位核心可影响官能团：

位点 物理基团 快速可用于发应性质

α-氨基 -NH₂ 与NHS酯反映，养成酰胺键

γ-羧基 -COOH 与胺现象（如Biotin-NH₂），需碱化工作

经常用到的标出攻略是借助其α-氨基与**NHS-纯化生物学素（Biotin-NHS）**想法建立稳定可靠的酰胺键。

三、合并线路提示

【细则一】5-ALA + Biotin-NHS

方法：

根据Biotin-NHS（N-Hydroxysuccinimide几丁质酶酯）与5-ALA氧分子上的伯胺做好酰胺键接连，化学反应前提平稳，高效、性价比最高特异。

环节简述：

取5-ALA溶解pH 7.4 PBS抗震液；

过慢滴入等摩尔的Biotin-NHS（易溶DMSO）；

轻搅匀，室内温度反响2–4每小时；

用HPLC或凝露层析的还原副产品（NHS）；

取到纯化的 Biotin-5-ALA 产品。

特征：

反應前提条件温柔，满足水相；

合成酰胺键平稳稳定；

菌物素端可与SA或菌物素体通过。

【设计二】5-ALA + Biotin via Spacer Arm

为增强构象轻松性和动物辨别热效率，可注入PEG或六碳/第十二碳韧性链做为时间臂（Spacer Arm），比方说便用：

Biotin-PEGₙ-NHS（n = 2~24）

Biotin-PEGₙ-Maleimide（适用前因后果硫醇反应迟钝）

该方案越来越适构造 多价标记图片整体、的表面偶联、动物感知网上平台。

四、企业产品质地与核实途径

创业项目 玩法

分子式名稱 Biotin-5-Aminolevulinic Acid（Biotin-5-ALA）

连结行为 α-氨基与生态学素羧基催化活性酯之間的酰胺键

可可溶性 水、DMSO

稳判定高性 酰胺键稳判定高，-20°C保存文档可大半年

质谱（MS）：大分子量认可；

NMR（¹H，¹³C）：成分属于；

HPLC：纯净度深入分析；

Streptavidin bead pull-down：生物制品素可溶性查验；

Western blot 或 ELISA（用SA-HRP检测器）：融合效果鉴定。

五、一般广泛应用范畴

1. PDT前体追踪定位

利用Biotin箭头的5-ALA驯养肉瘤内部系后，使用的荧光箭头链霉亲和素（如SA-FITC）检测工具内部系摄食量，采用：

摄食速率判断；

药动学道德行为探索；

各种受损细胞对5-ALA排泄线路的异同了解。

2. 菌物素化微米递送机系统构造

将Biotin-5-ALA淡化到纳米级技术脂质体、PLGA纳米级技术粒子束单单从表面，在SA介导的偶联可出现多价聚积、促进恶性肿瘤靶向治疗性：

创造出一个“5-ALA@Nano + Biotin-Streptavidin-Antibody”系統；

的提升PpIX在肺部肿瘤内的聚集与光发动机冶疗质量。

3. 亲和抓取与纯化

使用SA磁珠或亲和层析柱，含有摄取量了Biotin-5-ALA的细胞膜或进行原辅料，中用：

一定量深入分析；

特异体细胞聚集；

后期的RNA/蛋清质酚类化合物析。

4. 共价接枝平台网站原料

在动物资料（冷如冰抑菌凝胶、整合物、动物玻离）上引出5-ALA能力位点，顺利通过链霉亲和素中继软件连结体、蛋白酶、荧光检测器，代替创设动物积极地响应软件平台。

六、小心特别注意

方面 改进措施

5-ALA在水饱和溶液中易自缩合 现配使用，恒温背光保管

生态学素-5-ALA可以危害5-ALA分解绘制PpIX 提前准备氧化还原电位操纵，做對照组证实

Biotin-NHS易油脂水解解离 高低温潮湿吸收，用前新鲜感运行环境

SA-FITC等组合后手机表现很强 加入到PEG-linker 或所采用多价配位聚合的形式增强学习手机表现

七、结语

5-ALA的微动物技术性素标识为探讨分析其微动物技术性地理分布、血细胞摄食、靶向用量治疗递送及PDT目的措施保证了精度、灵便的产品。完成与链霉亲和素-荧光电极、磁体的相关材料、体用量治疗等的根据，倡导出可视化管理、可控制、自动化化设备化的多实用功能软件。随之微动物技术性正交化工、纳米技术性技术性和自动化化设备用量治疗平台的成长 ，Biotin-5-ALA将为肠癌医用集成一体化化、用量治疗措施阐明、微动物技术性的相关材料倡导等探讨分析范畴分享广阔的发展趋势。