荧光标记胆固醇衍生物定制技术

一、概述

热量高是类固醇脂质的注重体现，诸多参入生物工程膜创设、脂质保障体系统和类脂体口服药分享中。将热量高来荧光箭头（如FITC、Rhodamine、Cy5等），常用于生殖细胞动态化三维成像、热量高分解追踪定位、纳米技术质粒表现理论研究等。

二、定制合成技术流程

1. 胆固醇衍生物设计

普遍的可图标热量研究物例如：高胆固醇的食物-羧酸（Chol-COOH）蛋白质-氨基（Chol-NH₂）碳水化合物-羟基（Chol-OH）当中Chol-NH₂ 和 Chol-COOH 是荧光偶联的理想化前体。

2. 选择荧光染料及官能团

选用荧光标示物和其表现基团：FITC（异硫氰酸荧光素） → 影响氨基NHS-Cy5/Cy3 → 酰胺键连到氨基Rhodamine B Isothiocyanate → 与氨基不良反应Fluorescein-NHS ester → 与高胆固醇的食物-氨基共轭

3. 偶联反应过程

有机溶剂：DMSO、DMF、乙腈缓解器液：碳酸盐缓解器液（pH 8.0–9.0）温湿度：环境温度或4°C，闭光搅拌设备 12–24 h摩尔比：蛋白质：荧光基团 = 1:1.2（觉得合理超量荧光活性染料）

4. 纯化与表征

TLC或HPLC用在除去未生理反应荧光素质谱、NMR、UV-Vis、荧光光谱仪进行构造和性能指标核验

三、应用示例

低密度胆固醇转化示踪实践（受损细胞摄取量）脂质体中甘油三酯举动科学研究蛋白质淡化纳米级粒追查标记

四、常用试剂推荐

简称	功能
FITC、NHS-Cy5	荧光记号剂
Cholesterol-NH₂、Chol-COOH	标识前体
DMSO、碳酸盐响应液	液体软件
Sephadex G25柱	脱盐纯化

关于我们：

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