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靶向分子Angiopep-2(ANG)多肽修饰Ag2S硒化银量子点(含透射电子显微镜(TEM)表征图谱)
发布时间:2022-03-08     作者:axc   分享到:

Ag2SQDs(quantumdots)不是种创新的近红外二区(NIR,1.0~1.4μm)量子点,硒化银Ag2S量子点发射荧光峰位于近红外二区,作为新型的NIR-II荧光纳米探针具有高的量子效率,高的荧光强度且不会淬灭,表面经过生物分子修饰后,在细胞和动物上均未见明显的毒性,因此在活体成像中的应用研究倍受关注。目前常用的荧光探针按照荧光发射的波长可以分为可见光区(450~750nm)、近红外一区(NIR-I,750~900nm)、近红外二区(NIR-II,900~1400nm)。

在EDC/NHS的介导下,我们将Ag2S进行脑部靶向分子Angiopep-2(ANG)多肽的修饰,Angiopep-2多肽是由低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)配体抑肽酶Kunitz结构域设计演化而来的短肽(包含19个氨基酸残基),在BBB和胶质细胞瘤中有大量LRP1表达,Angiopep-2能被LRP1特异性地识别、结合,细胞膜内陷形成内化小泡,穿透BBB进入脑内,对血脑屏障和胶质瘤细胞(U87MG)具有双重靶向性。Angiopep-2入脑效率要明显优于转铁蛋白,而且容易修饰,因而被应用于脑靶向材料的修饰中。因此,本研究利用Angiopep-2多肽修饰Ag2S量子点构建具有脑靶向的近红外二区分子成像探针,

Angiopep-2(ANG)多肽体现Ag2S硒化银量子点(Ag2S-ANG)量子点的定量分析

从外观看,经过ANG多肽修饰后,溶液的颜色和荧光性质没有明显的变化,电泳结果显示,修饰ANG多肽的Ag2S量子点的条带位置要比未修饰ANG多肽的Ag2S量子点条带距离上样孔位置近(图1),琼脂糖电泳是根据分子量进行分离的,也就是说Ag2S-ANG量子点的分子量增加。

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Angiopep-2(ANG)多肽修饰Ag2S硒化银量子点的透射电子显微镜(TEM)

利用TEM对Ag2S和Ag2S-ANG量子点的粒径进行表征(图3),随机选取50个量子点,用GatanDigitalMicrograph软件分别统计Ag2S和Ag2S-ANG量子点的大小,结果发现,Ag2S量子点的粒径约5nm,Ag2S-ANG量子点的粒径约为7nm,经过修饰后粒径增大。结合电泳和DLS及zeta电位结果,表明ANG短肽成功修饰在Ag2S量子点上。

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Angiopep-2(ANG)多肽绘制Ag2S硒化银量子点的吸收及荧光发射光谱

为了考察肽修饰前后Ag2S量子点的吸收光谱和荧光发射光谱是否有变化,我们分别检测了修饰前后的吸收和发射光谱,从吸收谱看(图4a),Ag2S量子点修饰前后没有明显变化。从发射光谱看(图4b),修饰多肽后荧光强度有明显的增强,原因可能是修饰多肽后,多肽分子较大,包在量子点表面,减少了量子点的表面缺陷,使得荧光增强。

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上相关资料源于彩色哥axc,2022.03.08

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