Cy5 NHS，花青素5号虎珀酰亚胺酯的反应机制

Cy5 NHS 是一种常用的活性荧光染料衍生物，其核心结构为花青素类多亚甲基共轭体系，末端通过活化酯形式引入 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）基团。该 NHS 酯结构使 Cy5 NHS 具备较高的亲核取代反应活性，能够在温和条件下与含氨基的分子发生定向偶联反应，广泛用于蛋白质、多肽、寡核苷酸及其他生物大分子的标记。

从电化学发生现象基本原理方面看，Cy5 NHS 的发生现象人的本质一种亲核酰基改变发生现象。在温和怡人的加载條件下（常见为弱酸碱度环镜），目的分子结构中的3级胺或下级胺以未质子化形势具有，展现出较差的亲核性。当 Cy5 NHS 与含氨肌底物交往时，氨基上的孤对光电会进军 NHS 酯中羰基碳原子核，形成了一名不稳定性的三面体其中体。该四周围体里头体后来的发生重排，N-羟基虎珀酰亚胺做离去基团被放，羰基从新治愈为平稳形式设计，导致在 Cy5 碳原子与底物氨基互相变成平稳的酰胺键。这类操作过程不需用增加的离子液体剂，影响途径清晰度，副影响较少，不不利于得到形式设计明确的的标记符号终产物。响应必备条件对偶联科学率拥有更重要导致。pH 一般而言把控好在 7.5–8.5 之间，在该範圍内氨基拥有有足够的亲核可溶性，另外 NHS 酯的蛋白质溶解时延相对而言可以控制 。若网络标准体系偏酸，氨基易被质子化，响应时延大幅度降低；若酸性过强，则会推进 NHS 酯的非特异形蛋白质溶解，避免科学偶联比列。但是，科学的缓存网络标准体系是确认响应可以控制 性的关键的元素。在反馈整个过程中，Cy5 的花青共轭形式并不进行进入电物理键的变成，而且充当荧光功能键单元尺寸留下其光学元件材料性能。NHS 酯仅充当“电物理进行连接点”，做到染色剂与指标原子核式的共价综合。做好偶联后，Cy5 的荧光骨架仍做到全部，使标出原子核式遵循维持的光学元件材料走势输入输出学习能力。

产品名称：Cy5 NHS

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