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sulfo-CY5.5-NH2,磺酸基CY5.5氨基,水溶性-CY5.5-氨基的化学反应活性与机理
发布时间:2025-10-13     作者:axc   分享到:
sulfo-CY5.5-NH2,磺酸基CY5.5氨基,水可溶-CY5.5-氨基的化学响应响应活性氧与研究进展Cy5.5就是一类长可见光吸光度近红外荧光染剂,激励可见光吸光度约675–680 nm,试射约695–700 nm,相比之下Cy5更具更为重要的组织性通过水平和更低的情况组织化荧光。水溶解性-Cy5.5-NH₂(Sulfo-Cy5.5-NH₂)在Cy5.五分子骨墙上产生了磺酸基(–SO₃⁻)和伯胺(–NH₂)功效团:磺酸基:给予生产染料高宽比水阴离子型,可立即溶解完于PBS、HEPES等水溶液而不同生产容剂,最合适菌物标上和神经元养成室内环境。氨基:具备想法活性酶,可与羧基、醛基、异氰酸酯或纯化酯达成共价键,做到首次表达或偶联。水可溶Cy5.5-NH₂普通为深蓝/紫红液体,可溶水水和缓冲液,呈不稳定性的荧光程序,不要脂溶染色剂在水相中汇聚诱发自淬灭。2. 化学工业反响活性氧与机制重要作用结构类型:水阴离子型Cy5.5-NH₂重要确认其伯胺与亲电子技术基团转变成共价键。典型的作用原理有以下几点:与产甲烷羧基偶联(NHS酯、EDC产甲烷)氨基算作亲核免疫试剂,普通攻击羧基滋养中间的体(NHS酯或O-酸酐),行成维持的酰胺键。体现步骤之一:EDC或NHS纯化羧基,绘制O-纯化酯。Cy5.5-NH₂的氨基助攻羧碳,演变成酰胺键,尽情释放NHS。机制优缺点:化学反应温暖、pH 7–8极为梦想,转换成键维持。与醛基建成席夫碱(Schiff base)氨基与醛基或酮基缩合,变成亚胺(–C=NH–),可进两步抹除成动态平衡的五级胺(–CH₂–NH–)。所用于寡核苷酸或碳水化合物偶联。与异氰酸酯或环氧漆有机物偶联氨基攻占异氰酸酯或改性环氧树脂基,生产脲键或羟基胺键,用到遮盖多肽、血清或聚苯胺物表明。水可溶优点磺酸基提供水相单一性,削减非活性朋友粘附与自淬灭,反映在水相中速度高。解决脂溶染色剂所需生产溶液的困难,使其可会直接在生物工程工作体系标签。想法app实例:核蛋白符号:能够 酰胺键或席夫碱偶联至赖氨酸残基或N端氨基。核酸符号:氨基尾端偶联到纯化羧基装饰的寡核苷酸。用量-纺织染料偶联:氨基与用量质粒上的羧基或醛基搭配,满足荧光关注。3. 进行实验准备问题硫酸铜溶液室内环境:使用的PBS或HEPES响应液,pH 7–8,以免Tris或含氨响应液竟争。阴凉:Cy5.5对光太敏感,调查全部应阴凉操控。纯化:的发生反应后采用透析、凝露滤过或HPLC我们要除未的发生反应游离于颜料。摩尔比:按照其标志文本校准氨基与碱化基团的摩尔比,通常情况1:1至1.5:1。

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