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生物素标记猪去氧胆酸(Biotinylated Hyodeoxycholic Acid):合成、特性与应用研究
发布时间:2025-08-12     作者:ssl   分享到:

海洋生物素箭头猪去氧胆酸(Biotinylated Hyodeoxycholic Acid):结合、性质与软件应用探讨

一、摘要

胆汁酸是高胆固醇的食物代谢转化的其主要生成物其一,在脂类消化降解降解、肠内菌群转换及信息转导中引领最重要功效。猪去氧胆酸(Hyodeoxycholic Acid, HDCA) 有的是种在猪胆汁中含量较高的二羟基胆汁酸,兼有多样的位置构型与疏水-亲水区域结构特征,在肠内降解及胆汁酸蛋白激酶解锁中成绩出层次性的微生物几丁质酶。

将 HDCA 与生物制品技术素(Biotin)大分子偶联,可荣获生物制品技术素标上猪去氧胆酸(Biotinylated HDCA)。此类电学绘制不只是留下了 HDCA 的胆汁强酸质,还塑造其与亲和素(Avidin/Streptavidin)保障体系的高炎症因子聊天紧密联系的能力,然后变现了对胆汁酸完美用处的可视化管理、分离出来与高精准检验。


二、氧分子设备构造与性能

1. 猪去氧胆酸(HDCA)属性

HDCA 是属于 C₂₄ 胆汁酸,骨架由甾体四环形式(环 A-D)组成,C-3 与 C-6 位会有羟基,C-17 位扩展出含羧基的肌肉链。其疏水不弱,但在偏碱性要求下羧基阴阳离子化,可不能溶解水相工作环境。

2. 海洋生物素(Biotin)性能

动物素是一种种有 双环咪唑烷酮环与戊酸侧链 的维C(维C H/B₇),就能与亲和素或链霉亲和素以 Kd≈10⁻¹⁵ M 的极高吸引力整合,整合的时候基本上不可以逆。

3. 动物素标签强势

借助在 HDCA 上产生生态学素标识,能否借助亲和素指标体系展开紧固化、监测或纯化。类似这些改装十分最合适实验胆汁酸-蛋白酶激酶共同效用、肠子菌群细胞代谢与胆汁酸运输蛋白酶活力性。


三、自动合成原则

生物学体素标示 HDCA 的重要是将 HDCA 原子核上的羧基或羟基与生物学体素的可偶联位点对接。典型性结合路线图以下的:

1. 羧基碱化法(EDC/NHS 路线)

步聚:

在无水有机酸稀释剂(如 DMF、DMSO)中,在使用 1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺(EDC)纯化 HDCA 的羧基。

加如 N-羟基虎珀酰亚胺(NHS)转成 NHS 酯。

将氨基修饰语的怪物素(Biotin-NH₂)产生,导致固定的酰胺键偶联物。

显著优点:现象的条件温顺,产出率高,偶联位点明晰。

2. 羟基呈现法

若会选择在 C-3 或 C-6 羟基具体位置构建微生物工程素,可先将微生物工程素实验化作活性酶碳酸酯(如 Biotin-NHS carbonate),再与 HDCA 出现酯化反映。这般方案提取了 HDCA 羧基,满足想要恢复胆汁偏酸分布区的实验。

3. 连接管分子结构(Linker)注入

为了让抑制立体图位阻并上升融合生产率,一般来说在 HDCA 与菌物素当中参加 聚乙二醇(PEG)链段 或烷基链(如 C₆、C₁₂),进行 Biotin-PEGn-HDCA,上升在亲和素漆层的可达到性。


四、数学普通机械机械性质

团伙量:约 700–1000 Da(决定于于 linker 的粗度)

容解性:在有机酸相转移催化剂(DMSO、DMF、工业乙醇)中良好的,这部分延伸物在 PBS 中可溶。

平衡性:干涩、遮光、低溫(–20 ℃)情况下平衡,水普通的水溶液中需暂时性操作以尽量避免淀粉水解。

搭配形态:与亲和素类蛋清搭配讯速且牢实,能用于多轮冲洗掉实验操作。

生物素标记猪去氧胆酸(Biotinylated Hyodeoxycholic Acid)

五、生物体医美应该用

1. 胆汁酸肾上腺素受体钻研

HDCA 是法尼醇 X 感觉(FXR)与膜型胆汁酸感觉(TGR5)的具有配体之中。在怪物素符号,探索者可采用 怪物素-亲和素磁珠 生物富集通过蛋白质,介绍感觉与配体的通过位点与冲力学性。

2. 肠腔菌群代谢转化定量分析

消化道菌群可对胆汁酸实行去羟基化、氧化反应迟钝重置等反应迟钝。生物学素化 HDCA 能作为电极,侦测其在菌群细胞基础代谢期间中的和转化了物品,顺利通过亲和采集与质谱联用分享细胞基础代谢经由。

3. 胆汁酸转运公司蛋清(ASBT/OATP)性能加测

在細胞仿真模型中,生物学素记号图片 HDCA 能用于探索胆汁酸运输蛋白质的底物炎症因子朋友和运输波特率,针对荧光或蔓延性记号图片实行几吨检则。

4. 药物剂量递送网络平台

HDCA 格局与細胞膜脂质的主动的功效不强,用于为各种载体靶向药物肝部与胃肠。生物技术素化后,可灵活运用亲和素突显的奈米a粒子或脂质体保持 感觉介导的专向递送。

5. 原子核三维成像

若加大力度骤在亲和素上衔接荧光探头或放射学性示踪剂,微生物素化 HDCA 可满足 人体胆汁酸地域分布与分解代谢的三维成像监测站。


六、科学试验关注的注意事项

不良发应必备情况把握:EDC/NHS 不良发应必须弱碱性至中性化必备情况(pH 5.5–7.5)实施,以保障偶联成功率。

纯化:可按照反相 HPLC 或凝露进行过滤避开解离动物素和副剩余物。

的检测:可使用质谱(ESI-MS, MALDI-TOF)判定原子核量与偶联因素。

储放:烘干粉丝需 –20 ℃ 阴凉存放,以防含水率和强光照。


七、优质与随意性

优缺点

较高感染力相结合,最易猎取靶标

调取 HDCA 生物工程抗逆性,可通过系统探讨

化学上获得可控硅调光,纯更高、提前批次固定量分析好

局限于

生物制品素化概率改动 HDCA 的疏水性树脂与蛋白激酶亲和性

在体里研发中,生物体素箭头会决定胆汁酸的转运公司与分泌渠道


八、末来成长方面

可打孔接连

在 HDCA 与生物工程技术素相互之间接入可生物工程技术生物降解塑料或光敏切除的 linker,体现标记符号后不可逆转宣泄,避免结构特征修饰语对效果的损害。

多模态探头

依照荧光、磁共鸣或核医学界示踪,做到多模态影像与能力定量分析。

结构特征网站优化

探究多种的位置和链长的生物体工程素遮盖对 HDCA 生物体工程活力性的损害,开拓更快特异形、更低干忧的测试探针。


九、实验结论

菌物机系统工程素标记符号猪去氧胆酸有的是种兼有胆汁酸菌物机系统工程技能与混凝土泵送亲和截获性能的原子测试检测器。顺利通过菌物偶联机系统,将菌物机系统工程素的可辨认性与 HDCA 的肾上腺素感觉靶向疗法性通过,可丰富运用于胆汁酸消化吸收研发、肾上腺素感觉技能解密、消化道菌群功能共识机制探秘以其药递送机系统装修设计。随之聚合最简单的方法和验测机系统的全面发展,同类测试检测器在地基研发与药学转为中体现了宽阔发展前途。

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