商产品各称：Cy3 Acid(mono SO3)的运用方式 适用手段标出前筹备：方向分子结构治理：淀粉酶质/多肽：保证 的目标分子结构含自由氨基（如赖氨酸残基或 N 端氨基）。若氨基被确保（如用乙酰基确保），首先需要依据强碱要求（如 0.1 M NaOH）脱确保。缓解液取舍：介绍加载器液：PBS（pH 7.4）、MES（pH 6.0）或 HEPES（pH 7.0），尽量不要含氨基的加载器液（如 Tris 或甘氨酸）。修改剂：可修改多量有机物高沸点溶剂（如 DMSO 或 DMF，终氧化还原电位 ≤5% v/v）从而提高颜料溶解性度。标签体现：EDC/NHS 纯化羧基：关键步骤：将 Cy3 Acid (mono SO₃) 析出于 DMSO 或 DMF（终含量 ≤10% v/v）。申请加入 EDC（终质量浓度值 5-10 mM）和 NHS（终质量浓度值 10-20 mM），恒温产甲烷羧基 15-30 几分钟。将纯化后的染色剂入驻含工作目标团伙的加载液中，制冷孵育 1-2 一小时。摩尔比：常常活性颜料与的目标原子的摩尔之比 1:1-5:1（吃太多活性颜料可提高了标出利用率，但需事后纯化剔除未作用活性颜料）。可以箭头（无滋养）：可用于不一样：若总体目标分子结构结构氨基现象催化活性高（如抗原），可会直接混合型活性染料与分子结构结构，常温孵育 2-4 半小时。留意作用：需提高有机染料渗透压和化学反应时以杜绝太过标签造成的荧光淬灭。纯化与校验：纯化的办法：脱盐柱：选应用在大分子式（如蛋白酶质）的纯化，消除未想法有机染料和小大分子式硫氰酸盐。疑胶滤过：运用 Superdex 75 或 200 柱分离出来标识代谢物与未表现纺织染料。HPLC：反相 HPLC（如 C18 柱）可更高效分割标记符号多肽或小碳原子。证实方法步骤：荧光加测：能够 荧光分光光度计或凝露影像装置验正标示副产物的荧光发射成功。SDS-PAGE：标杆记核蛋白酶质通过电泳浅析，分析荧光条带与核蛋白酶条带是一样的。质谱：按照 MALDI-TOF 或 ESI-MS 认可图标代谢物的原子核量变化。和谐警告：仅应用在科研开发，没有应用在人体内实验英文！wyh

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