CY7-MAL,花菁染料CY7-马来酰亚胺的使用方法
产品名称:CY7-MAL,花菁染料CY7-马来酰亚胺的使用方法
实用形式图标前打算:对象分子式整理:营养物质质/多肽:为了保证指标分子结构含悬浮巯基(如半胱氨酸残基)。若巯基被保护的(如用TCEP或DTT保存成二硫键),首先需要完成脱盐柱或透析洗去保存成剂。肿瘤癌细胞核/进行:如需活肿瘤癌细胞核标记图片,需进行清新的响应状况(如低盐浓度、多日间)以禁止肿瘤癌细胞核破损。缓解液进行:推存减慢器液:PBS(pH 7.4)、HEPES(pH 7.0)或Tris-HCl(pH 7.5),尽量避免含螯合剂(如EDTA)的减慢器液。增添剂:可增添小量生物碳容剂(如DMSO或DMF,终溶液浓度≤5% v/v)增长CY7-MAL的溶水度。标注反應:摩尔比:一般是CY7-MAL与关键大分子的摩尔之比1:1-5:1(过度染色剂可挺高标记图片速度,但需下一步纯化洗去未的反应染色剂)。影响模式:直接的相溶:将CY7-MAL容解于DMSO或DMF(终渗透压≤10% v/v),建立含指标大分子的减慢液中,制冷孵育3015分钟至2分钟。闭光操作方法:CY7对光比较敏感,需要在暗处或黄光下通过作用。发应停止:进入巯基围合剂:如N-乙基马来酰亚胺(NEM,1-5 mM)围合未响应的巯基,预防副响应。纯化前补救:在脱盐柱或透析去掉未影响活性染料和小原子核杂质残渣。纯化与验证通过:纯化形式:透析:可采用于大生物大原子(如淀粉酶质)的纯化,快速清理未发生反应染色剂和小生物大原子杂质残渣。抑菌凝胶过滤器:便用Superdex 75或200柱提取标签产品与未反應染色剂。HPLC:反相HPLC(如C18柱)可快速分离出来标识多肽或小原子核。验正形式:荧光检查测量:依据荧光分光光度计或抑菌凝胶成相程序效验标注副产物的荧光使用。SDS-PAGE:对标学习记淀粉酶质开始电泳分析一下,观测荧光条带与淀粉酶条带是否有不对。质谱:能够 MALDI-TOF或ESI-MS验证符号化合物的氧分子量变化。温磬提示信息:仅用作科研开发,并不能用作人检测!wyh


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