CY7-MAL,花菁染料CY7-马来酰亚胺的使用方法
产品名称:CY7-MAL,花菁染料CY7-马来酰亚胺的使用方法
实用技巧标注前做准备:对方原子核操作:血清质/多肽:切实保障制定目标原子核含存在巯基(如半胱氨酸残基)。若巯基被防护(如用TCEP或DTT回归二硫键),首先需要在脱盐柱或透析去掉回归剂。癌受损组织细胞/安排:如果需要活癌受损组织细胞标识,需选泽平稳的的反应经济条件(如低氧化还原电位、间歇间)以以防癌受损组织细胞破损。缓存液确定:推建抗震区液:PBS(pH 7.4)、HEPES(pH 7.0)或Tris-HCl(pH 7.5),预防含螯合剂(如EDTA)的抗震区液。加剂:可加几瓶无机稀释剂(如DMSO或DMF,终溶度≤5% v/v)从而提高CY7-MAL的析出度。标识的反应:摩尔比:常见CY7-MAL与梦想分子结构的摩尔比是1:1-5:1(咖啡因中毒染剂可增强标识学习效率,但需以后纯化快速清理未发生反应染剂)。反响网络体系:随时混合型喂养:将CY7-MAL溶于于DMSO或DMF(终氧化还原电位≤10% v/v),假如含学习目标氧分子的缓冲器液中,高温孵育307分钟至2每小时。闭光的操作:CY7对光明感,需到暗处或黄光下去反馈。化学反应暂停:加盟巯基围合剂:如N-乙基马来酰亚胺(NEM,1-5 mM)围合未反應的巯基,避免 副反應。纯化前清理:在脱盐柱或透析我们要除未现象活性染料和小大分子残渣。纯化与确认:纯化方式:透析:不适用做脂溶性式(如蛋清质)的纯化,除掉未反响颜料和小原子式沉淀物。凝露油烟净化器:实用Superdex 75或200柱脱离图标产品与未响应有机染料。HPLC:反相HPLC(如C18柱)可优质破乳标记符号多肽或小团伙。印证步骤:荧光验测:在荧光分光光度计或疑胶三维成像控制系统验证通过标注结果的荧光反射。SDS-PAGE:对标学习记核营养物质实现电泳定性分析,洞察分析荧光条带与核蛋白酶条带能不一直。质谱:依据MALDI-TOF或ESI-MS要确认图标产品的团伙量变化。和谐温馨表明:仅使用在科研管理,是不能使用在人體测试!wyh