Cy5.5标示β2微球核蛋白，Cy5.5-β2-microglobulin的制成及纯化全过程β2-微球淀粉酶（β2-microglobulin，β2-MG）就是一种轻链血浆淀粉酶，碳原子量约11.8 kDa，是内非常重要的免疫细胞调低细胞。Cy5.5图标β2-微球淀粉酶的炼制及纯化时候涉及到高效化偶联、纯化区分和质理论文检测，确保荣获组成部分完整性、特点渗透性的图标结果。制成工作化学原料做好准备：高色度β2-MG球蛋白酶互溶于降低液（如PBS，pH 8.0），保障球蛋白酶动态平衡性。Cy5.5-NHS酯互溶无水DMSO中分离纯化贮备液。偶联的反应：以适度摩尔比（如1:2至1:5，球蛋白:染剂）将Cy5.5-NHS酯比较慢加入适量至β2-MG饱和溶液中，不起作用在4℃至常温下比较慢左古摇摆，用时约2–4一小时。不起作用有机溶剂pH保证在8.0左古以抓实氨基的活力。化学反应生理机制：Cy5.5-NHS酯与β2-MG的赖氨酸残基ε-氨基会出现亲核所代替，行成安稳酰胺键，保证荧光标签。该环节不同离子液体剂，生活条件清新，合理有效杜绝球蛋白变形。不良反应解除：注入甘氨酸等解离氨基物闭合未作用迟钝的NHS酯，制止未果作用迟钝，增强标记图片结果。纯化环节透析或凝露滤水：所采用透析（MWCO 3-10 kDa）或抑菌凝胶进行过滤柱（如Sephadex G-25）出掉游离子未体现染剂和小团伙悬浮物，得到粗纯品。高效率的高效液相色谱（HPLC）纯化：进十步采取反相HPLC（RP-HPLC）纯化，采取C18柱，系数洗刷（乙腈-水，含微量分析TFA）分开符号核蛋白酶酶与未符号核蛋白酶酶及副终产物。监测方案吸光度设为280 nm（核蛋白酶酶）及675 nm（Cy5.5），验证纯品峰。纯品分类整理及精提：搜集工作目标峰，制冷常温、干燥取得纯性强、维持的Cy5.5-β2-MG液态乙酰乙酸。水平保持质谱进行分析：认可箭头大分子量与理论上值接触，安全验证偶联顺利完成。UV-Vis和荧光光谱图：测量Cy5.5的消化吸收峰和荧光射，考评活性酶染料活性酶和偶联率。SDS-PAGE及免疫检测痕印：查验血清系统性和标识时候。

产品名称：Cy5.5标志β2微球蛋白质，Cy5.5-β2-microglobulin

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仅供科研，不能用于人体实验AXC.2025.06.23