链霉亲和素偶联多聚HRP(Streptavidin-Poly HRP)成品了解
链霉亲和素偶联多聚HRP(Streptavidin-Poly Horseradish Peroxidase,英文缩写Strep-PolyHRP)也是种高敏感度、高特男人的动物学探头,范围广使适用酶联免役系统溶解实验报告(ELISA)、免役系统安排普通机械(IHC)、免役系统印刷痕迹(Western blot)和免役系统荧光等四种动物学检查体系建设中,格外适使适用应该高4g信号图像放大的技术应用场合,如低丰度核蛋白检查和超敏免役系统解析。
一、类产品组成部分与机构作用
链霉亲和素(Streptavidin)也是种四聚体蛋白质,兼备与动物素(Biotin)区间内高的吸引力(Kd ≈ 10⁻¹⁵ M),经常用于动物素标志物的驯服。多聚HRP也是种将各个辣根过钝化物酶(HRP)酶氧分子共价偶联在1个整合骨架子上的机构,相较于于过去的的两只一HRP偶联系统,其可大明显增强催化氧化反应迟钝工作能力。
Streptavidin-PolyHRP 将链霉亲和素与多聚HRP酶经由交连技术水平偶联,具有角度的融合特男人与酶离子液体速度,是移动信号提升检侧程序中切勿或缺的核心内容工貝。
二、设备优质
高灵敏性度电磁波调大:每一位Streptavidin大氧分子可随带不低于数十二个HRP酶大氧分子,相关性资料电磁波运行;
高责任心紧密组合:忽略于Streptavidin-Biotin间的强劲责任心,保障紧密组合平稳性和特男人;
应用宽泛性:采比较适合ELISA、IHC、WB、免疫细胞染色的和许多酶联探头设计;
低底色:简化的面积的结构和纯化工新材料艺拉低非特女性朋友切合;
兼容很多种底物:如TMB、DAB、ABTS等HRP最常见底物均可更换,会产生显色或物理出现发亮数据信息。
三、技术应用的指标
项目流程 讲解
外觀 答复或微尿液混浊水溶液,夹杂着深褐色
偶联比 几团伙Streptavidin偶联10~40个HRP酶团伙(会按照商品尺寸与众不同)
酶生物 >250 U/mg(标准化过化合物物酶生物检验)
保存液 PBS缓存液,含BSA、甘油、抗腐蚀剂
存贮因素 -20°C 不断存贮,不要对此冻融;4°C中短期动用
有效性期 一般1多个月往上(常温遮光)

四、技术应用范例
ELISA探测
方案:将生物体素标上的一*或探头与靶*原依照后,加入到Streptavidin-PolyHRP开始两级检验。
功效:相对于过去的HRP图标二*,其手机信号缩放10~100倍,十分可使用在探测pg/mL或更低渗透压的梦想碳原子。
Western blot资料法
方式 :便用微生物素化二*辨别的最终目标淀粉酶,后期用Streptavidin-PolyHRP搭配并听取ECL底物发光字广告测量。
好处:比较适合低丰度核蛋白的超敏测试,少曝料时间间隔,改善信噪比。
天然免疫公司化工(IHC)着色
手段:适用生物制品素化一*或二*后,融入Streptavidin-PolyHRP及DAB显色底物。
功效:刺绣清洗,蓝本低,实中用淋巴肿瘤标志logo物、真菌感染要素等靶点刺绣。
生物工程素标记符号核酸或多肽电极的检则
应用领域:如RNA原位混种杂交(ISH)、多肽组学产前筛查等实验性中,生物体素标注验测器可完成PolyHRP显色扩大警报,增加验测流畅度。
五、运行最好是
安利掺水比率:遵循原则实际上实验室组织体制,传统ELISA安利1:5000 ~ 1:20000掺水,IHC安利1:200 ~ 1:1000;
孵育周期与温:通常情况个人建议常温孵育30-60分钟左右或4°C留宿;
洗洁的条件:每步食用PBS-T响应液洗洁3次,一段时间五分钟的时间,以削减游戏 背景;
尽量不要总是冻融:为了能维持酶活性酶类及偶联稳定度处理性,意见和建议预包装便用。
六、注重要点
最好解决在管理体系中放入大量分散生物学素,如果将与Streptavidin激烈竞争融合,扰乱实验性;
若模式中出现内源性生物学制品素(如些组识薄片中),建意要预先利用生物学制品素阻挡化学药品;
个别游戏场景下,如需进一部改善数据,可充分考虑运行**Tyramide Signal Amplification(TSA)**设计与PolyHRP运用运行。


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