CMP-C9-Azido-Sialic Acid:构成特殊性、生物体正交运用与糖水利理论研究
一、底色详细资料
津液酸(Sialic acids)是大面积普遍存在于喂乳爬行动物血人体细胞面糖链末商品详情页九碳单糖,极具负正电荷、亲水溶性和高强度层次性性的成分特性。它在血人体细胞鉴别、数据信号转导、免疫系统调结、癌症转到等阶段中起的关键目的。里面,N-乙酰神经末梢氨酸(Neu5Ac)是普通的那种。
CMP-sialic acid(内部苷酸吐沫酸) 是吐沫酸在内部按照CMP-sialic acid synthase 激酶使用与胞苷一磷酸(CMP)综合的活性酶类手段,是糖基转变酶在糖基化症状中的底物。
为着研发糖链实用功能键、提升糖基化经过、引进可符号实用功能键团,研发者设置并提炼了四种人工费口水酸相似物,在当中**CMP-C9-Azido-Sialic Acid(9-叠氮口水酸胞苷单磷酸)**而使有着叠氮基团(azide group)而变为同类最重要的微生物正交符号免疫试剂。
二、生物框架与排列顺序
CMP-C9-Azido-Sialic Acid 的药剂学名称大全一般而言为:
Cytidine-5'-monophospho-9-azido-5-N-acetylneuraminic acid
其架构由五部分形成:
Neu5Ac 主要:有点 9 位氮代替的 N-乙酰脑神经氨酸;
Azide 基团 (-N₃):隶属于第八碳原子核(C-9),谋生物正交发生反应位点;
CMP(胞苷-5'-单磷酸)无线连结一部分:经过α-1,5 糖苷键无线连结 Neu5Ac C2 羟基与 CMP。
其分子结构量约为 662.5 g/mol,常以水饱和溶液或冻干粉形势儲存,平稳性比较好。
三、镶嵌自驾线路现状分析
合成视频CMP-C9-Azido-Sialic Acid一般说来需经验下列这两个关键点环节:
1. 9-Azido-Neu5Ac 的合并
运用自然Neu5Ac为底物,在温润条件下将C9位羟基还原成为叠氮基(N₃);
常所采用氯磺酸酯转成法,或在甲磺酸酯中部体与NaN₃采取亲核被淘汰;
确定α-立休会可选择性并删去Neu5Ac的形式完成性。
2. CMP 无线连接化学反应
将9-Azido-Neu5Ac与胞苷-5'-三磷酸(CTP)在酶(如CMP-sialic acid synthase)或耐腐蚀离子液体剂(如CDI)有发布生缩合,出现CMP-C9-Azido-Neu5Ac;
四、生物体正交标识体系
CMP-C9-Azido-Sialic Acid 的大优缺点是转化了了个高宽比维持而不不干扰怪物标准的叠氮官能团(N₃)。该官能团可操作下面症状:
1. 铜催化氧化叠氮-炔环暴伤表现(CuAAC)
与含炔基的探头(如Alkyne-Cy5、Alkyne-Biotin)实现共价偶联;
建立组织外表口水酸的可视化数据、拉下具体分析、免疫系统共地位等。
2. 应变力推进的点击进入响应(SPAAC)
与DBCO、BCN等应变速率炔反應,无须铜催化反应的作用剂,比较合适活血细胞和休内组织体制;
适用小动物建模方法中的排泄标志及机体影像。
因此生物学正交生物学症状拥有高特异形、高传输率、低底色等优势可言。
五、产生标记图片与糖链工程建筑
1. 神经细胞单单从表面吐液酸的交互
将CMP-C9-Azido-Sialic Acid以底物结构达到供给充足组织,途经α2,3-或α2,6-口水酸转至酶催化生理反应,掺杂组织糖链的后部。继而与Cy5-alkyne、AF488-alkyne等生理反应,达到组织单单从表面糖链可视化分析影像。
选适用于:
恶性肿瘤膜糖链形式不同正常识别;
面上糖链情况变化规律钻研;
单细胞膜糖图谱整合。
2. 糖链改善与糖项目工程
CMP-C9-Azido-Neu5Ac 能作为“功能表化糖核苷酸”,适使用干预糖基移动酶活力或行业抑制性大自然底物,最终得以抑制糖链炼制,适使用的研究:
脑神经元发育期与突触糖链转化;
癌肿糖链问题下列关于模块;
噬菌体、病毒有哪些、体与津液酸彼此之间用途。
3. 靶向药物递送与免疫性提高
利用将azide糖获取癌症体细胞结构外表,再与微生物正交特点大分子(如体-DBCO)运用,达成:
靶向治疗奈米食用的药物递送;
免疫检测成功激活(click-to-release)方案;
肺炎疫苗原表位装饰。
六、广泛应用经典案例列举
實驗一:上皮细胞漆层糖链激光散斑
在HeLa体细胞中转地染ST6Gal-I理解的载体;
增加CMP-C9-Azido-Neu5Ac用于供体;
与AF488-DBCO生理反应30分;
荧光显微镜下探究生殖细胞结构绿化荧光。
实验报告二:小鼠身体内部糖链标签
尾静脉血管注射液体CMP-C9-Azido-Neu5Ac;
24一小时后打针Cy7-DBCO;
IVIS近红外三维成像表明肝功能、脾脏和淋巴肿瘤组织化荧光不断增强;
使用于组织机构特异形糖链表达出解析。
七、优势可言与特别注意法定程序
的优势:
与具有CMP-Neu5Ac设备构造相似性,可被很多人都是数吐液酸迁移酶自动识别;
Azido 基团小、安全、不不良影响糖链室内空间构象;
符合于活肿瘤细胞、爬行动物模式化;
与很多电极(荧光、磁体、放射学性、治疗药物)可有机化学接枝。
注重法定程序:
铜离子液体点选不良反应很有可能对细胞膜没害性,活体符号提倡使用的SPAAC;
某类人体细胞对CMP随之出现物摄食质量较低,需辅助器装运策略;
保存需高温闭光,尽量不要叠氮进行分解;
采用前需确保无自由Azide检测器残留物,以预防图片背景无线信号。
八、结语与回顾与展望
CMP-C9-Azido-Sialic Acid作一个设计精细、平台高强度可以控制 的吐液酸衍化物,为研究方案糖链平台、共建糖工程施工平台及设计规划复合型靶向药物诊疗方式打造了庞大方法。随之怪物正交枝术、消化吸收标志方式和多模态激光散斑行为的迅速壮大,CMP-C9-Azido-Neu5Ac将在下面的教育领域突显挺大空间:
糖蛋清质组学与糖链图谱绘图;
CAR-T组织细胞结构糖表达;
肺部肿瘤特异形免疫细胞重置;
“Click-enabled” 自动化递药电商平台;
脱贫攻坚糖化防疫针与生物制品素材激发。
它作罢为当今糖微物理学切勿或缺的生化试剂中之一。
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