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FITC-CAQK(荧光素标记 CAQK 多肽)定制合成技术
发布时间:2025-07-29     作者:zhn   分享到:

FITC-CAQK(荧光素标记 CAQK 多肽)定制合成技术

1. 多肽与标记策略

CAQK(Cys-Ala-Gln-Lys)是种针对性中枢周围神经末梢周围神经末梢装置髓鞘脱髓鞘行政区域特异形集聚的小肽,常用于周围神经末梢神经挫裂伤靶向药物药物递送(譬如,发多性软化、脊髓神经挫裂伤模型工具)。将 FITC(异硫氰酸荧光素)标记符号在 CAQK 的 N 端或侧链 Lys 上,不错做到并且具备着靶向药物药物(CAQK 鉴别 ECM)与荧光追查实用功能。

2. 合成技术流程

肽段制作而成:用 Fmoc 固相肽制作而成(SPPS),按顺序制作而成 Cys-Ala-Gln-Lys 的四肽,经常使用 Wang 光敏树酯或 Rink 光敏树酯充当膜蛋白;Spacer 加入图:为避免出现 FITC 记号后因位阻或酸促裂产生 N-端*后一有机酸松脱,建立在未端 Lys 或 N-端加入图时间子(如 6-氨基己酸 Ahx);FITC 偶联:将 FITC 在有效保证清掉后溶水 DMF,并在 pH ~9.0–9.5 的弱碱先决条件下与脱保证的 N-端胺或 Lys ε-胺影响进行可靠的硫脲键;脱聚酯树脂与纯化:作用实现后用 TFA 萃取剂裂解肽链并清除保障基,接着经由 反相 HPLC(C18 柱)纯化;质量管理数据分析检验通过:用于 MALDI-TOF 或 ESI-MS 确保氧分子量,HPLC 彰显色度 ≥95%;¹H-NMR 检验通过 FITC 物理节构炼制是不是正确无误。

3. 技术优化要点

FITC 偶联*好在固相肽制作而成提交后直接去,避开 FITC 在酸碱性裂解中发生环化促使数据信息衰竭;Ahx 链或 β-Ala 等簡短 spacer 最为缓冲器缩短面积电磁波辐射,改善藕合热效率;现象以免 光线照射、防氧化,推荐闭光在 4 °C 儲存,干澡另存。

4. 表征与应用

荧光光谱解析測試:FITC 刺激约 495 nm,使用约 519 nm;适用于荧光显微、流式的解析等软件探测;靶点效验:在髓鞘板材损害模式中赋予 FITC-CAQK,比较可观察其在病灶 ECM 中的累积,效验 CAQK 的靶点因素;保持稳明确测试:评估方法在血管、PBS 自媒体中的荧光保持稳明确与细化条件;分子量与荧光力度调校:在规范标准的身材曲线衡量荧光力度与肽溶度关心。 

FITC-CAQK

产区:西安市pg电子娱乐游戏app 生物学

种类:科研项目

外包装:桶装


就人们:

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