O-连N-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)修饰技术-西安pg电子娱乐游戏app
生物
O-连N-乙酰氨基葡萄糖(O-GlcNAc)修饰技术
1. 技术背景
O-GlcNAc 为糖蛋白中常见的α-O-N-乙酰氨基葡萄糖修饰,用于研究蛋白质功能调控、信号转导、癌症与代谢疾病机制。可将O-GlcNAc定位于特定蛋白质构象或位置,以进行生化研究或靶向修饰。
2. 合成策略
药剂学羟基选定 性乙酰化:将指标血清或寡肽的Ser/Thr上羟基与GlcNAc-OH藕合;N-羧基活性法:利用GlcNAc-COOH活性为NHS酯,使其与核蛋白羟基或胺基偶联;酶促装饰:主要包括O-GlcNAc转变酶(OGT)在UDP-GlcNAc供体发生下实行酶催化反应用处。3. 合成流程
合并GlcNAc-NHSUDP-GlcNAc水释怀磷活性或化学物质获得成型GlcNAc-COOH,接下来EDC/NHS活性;淀粉酶偶联症状在PBS缓存下(pH 7.5–8.0),GlcNAc-NHS缓缓建立计划蛋清,制冷1–2半小时;纯化透析或疑胶筛选(如Sephadex G-25)弄掉解离修饰物;酶法能选OGT与UDP-GlcNAc共症状于20–37℃,酶氨水浓度及底物分配比例提升以设定突显度;认定与定性分析回收利用Western blot(抗-O-GlcNAc抵抗能力)、MS(MALDI-TOF/LC-MS)证实掩盖层度;利用糖密度计算检测(如苯巴瑞蓝法)降钙素原检测呈现位点。4. 工艺节点控制
准确度管理绘制摩尔比(1:1–1:10),以免适度绘制干扰蛋白酶特异性;影响缓冲器具体条件(pH、摄氏度)确保蛋白酶稳固;OGT酶活响应插件如Mg²⁺、UDP-GlcNAc氧化还原电位SEO优化;背光操控可解决糖的分解。5. 应用方向
O-GlcNAc位点功用科学研究与电磁波信号通路详细分析;适用于PTM调节管控的核蛋白组学研究分析;与抗体阳性共轭完成靶向疗法判断app引入;制取抗-O-GlcNAc役苗备选抗原。规格:mg与g级别
产地:西安pg电子娱乐游戏app 生物
用途:科研
左右的资料由pg电子娱乐游戏app 生物技术神评zhn提拱,仅广泛用于科研工作
关于我们 :
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