齐墩果酸（Oleanolic Acid, OA）的荧光标记技术

1. 荧光标记原理与策略

齐墩果酸分子含有羧基、烯烃结构，可通过“羧基–氨基”或“羧基–羟基”形成酯、酰胺键与荧光染料偶联。常用染料包括FITC（异硫氰酸荧光素）、Cy5、Cy5.5、Alexa Fluor 和 DyLight 系列。

a. FITC标记

无机化学逻辑思维：OA–OH（酯化）或OA–COOH（酰胺）与FITC异硫氰酸基表现，标记图片后荧光在提升 ~490 nm，使用 ~520 nm。作用：成本费低、平时体视显微镜代用，荧光难度适度，但光固色较特别 。

b. Cy5/Cy5.5标记

方案格式：巧用Cy NHS酯与OA的羧基生理反应自动生成Cy5-OA/Cy5.5-OA。胜机：近红外鼓励（≈650–700 nm）、射（≈670–720 nm），游戏 背景低、通过深 。采用图片：Cy5-OA用作小鼠原位淋巴肉瘤成相，在淋巴肉瘤部分荧光数据很深高过肝胀，适用于实时公交监测数据用药生物富集 。

c. 其他染料

Alexa Fluor 647、DyLight 650/680 能用于多缓冲区激光散斑。标示成功率高、光比较稳判定优；需不同测量仪器兼容性测试激励源。

2. 实验流程与注意事项

人工水平：OA与荧光NHS酯（Cy5、FITC等）在干燥的DMSO或DMF中，加入到偏碱性消泡剂（如TEA或DIPEA），在常温2–4 h。纯化步凑：作用后用硅胶材料柱或半光催化原理HPLC纯化，证实单峰。

表征确认：

MS 或 HR-MS 要确认分子结构量变化；荧光光谱图检查符号转化率；核磁根本至关重要官能团的组合（酰胺或酯键建成）。生物学操作：血肿瘤细胞/节肢动物實驗前狠抓除去解离有机染料，并验测血肿瘤细胞毒副作用（MTT、CCK-8）。

3. 应用示例

神经上皮细胞成相：Cy5-OA可以于共焦点光学显微镜留意神经上皮细胞内导航定位系统，如共导航定位系统线粒体、内质网或脂滴 。人体内显像：根据小各种动物活体荧光显像仪，能作于开展药物治疗区域及积聚。术中车载导航、肿癌动态化监测技术具备有优势 。细胞分解代谢长效机制的研究：荧光难度波动反映出OA降低、细胞分解代谢具体情况。 

用途：仅应用于科研，不能用于人体实验！

以上资料由小编zhn提供，仅用于科研

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