齐墩果酸（Oleanolic Acid, OA）的荧光标记技术

1. 荧光标记原理与策略

齐墩果酸分子含有羧基、烯烃结构，可通过“羧基–氨基”或“羧基–羟基”形成酯、酰胺键与荧光染料偶联。常用染料包括FITC（异硫氰酸荧光素）、Cy5、Cy5.5、Alexa Fluor 和 DyLight 系列。

a. FITC标记

化学上的思想：OA–OH（酯化）或OA–COOH（酰胺）与FITC异硫氰酸基化学反应，标记符号后荧光在刺激 ~490 nm，发 ~520 nm。优点和缺点：的成本可控、日常显微镜观察公用，荧光构造均衡，但光氯漂较明星 。

b. Cy5/Cy5.5标记

实施方案：利于Cy NHS酯与OA的羧基生理反应转换Cy5-OA/Cy5.5-OA。胜机：近红外激起（≈650–700 nm）、导弹发射（≈670–720 nm），底色低、刺穿深 。软件应用具体方法：Cy5-OA用做小鼠原位恶性良性肿瘤三维成像，在恶性良性肿瘤身体部位荧光讯号比较突出远远超出肝部，适宜立即监测方案药品丰度 。

c. 其他染料

Alexa Fluor 647、DyLight 650/680 适用于多缓冲区三维成像。性子能力高、光保持稳确定优；需据检测仪器适应发挥源。

2. 实验流程与注意事项

人工前提条件：OA与荧光NHS酯（Cy5、FITC等）在干躁DMSO或DMF中，融入碱促进剂（如TEA或DIPEA），制冷2–4 h。纯化环节：作用后用硅胶材料柱或半分离纯化HPLC纯化，证明单峰。

表征确认：

MS 或 HR-MS 判定分子式量变化；荧光光谱图探测记号速率；核磁证明最为关键的官能团的结合起来（酰胺或酯键达成）。怪物APP：生殖細胞/动植物科学试验前确保安全生产避开游离于颜料，并检验生殖細胞致毒（MTT、CCK-8）。

3. 应用示例

内部三维成像：Cy5-OA可以用在于共聚交电子显微镜关注内部内追踪品牌定位，如共追踪品牌定位线粒体、内质网或脂滴 。内影像：根据小动植物活体荧光影像仪，可以选择于风险评估药材布置及积聚。术中导航导航、恶性肿瘤情况监测站具有着竞争力 。基础基础代谢体制钻研：荧光效果变换反映了OA脱离、基础基础代谢事情。 

用途：仅应用于科研，不能用于人体实验！

以上资料由小编zhn提供，仅用于科研

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