FITC-Hemoglobin(绿色荧光素标记血红蛋白)定制合成技术
FITC-Hemoglobin(绿色荧光素标记血红蛋白)定制合成技术
技术概述
FITC(荧光素异硫氰酸酯)是一种广泛应用于蛋白质标记的绿色荧光染料,可与蛋白质中的**胺基(主要为赖氨酸残基)特异性共价结合。将FITC与血红蛋白(Hb)**偶联,不仅能实现Hb在体内的可视化追踪,也可用于氧输运研究、光热治疗载体标记、蛋白转运示踪等方向。
合成工艺流程
1. 材料准备
猩红蛋白酶(人源/牛源)FITC(互溶DMSO或碳酸盐缓存液)减慢液:0.1 M 碳酸氢钠减慢液,pH 9.02. FITC标记反应
将Hb析出于碳酸盐减慢液中(1–10 mg/mL)。进入FITC稀硫酸(摩尔比FITC:Hb ≈ 10:1),闭光化学反应4–12 h,水温操纵在4°C。的反应阶段中即时搅拌设备,控制蛋白质积累。3. 分离纯化
食用Sephadex G-25疑胶净化柱或反渗透膜(10 kDa膜)弄掉未结合起来的FITC。可能够 透析进一次祛除小碳原子。4. 标记效率评估
食用分光光度计-见到光分光光度计探测280 nm(蛋白酶)和495 nm(FITC)吸纳。运算标注度:FITC/Hb摩尔比能致用荧光光谱分析(λ_ex=495 nm, λ_em=519 nm)证实荧光安全性能。5. 储存条件
闭光、4°C储存于PBS或HEPES中,禁止致使反复冻融。技术亮点
FITC记号选择Hb组成部分和性能,使用以活体成相、癌细胞摄入科学研究。技术一个温和,适用大面积生物学标出配制。可户外拓展培训为氧解放数据可视化科研网络平台。制造地:咸阳pg电子娱乐游戏app 菌物
功能:教学科研
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