FITC-Hemoglobin（绿色荧光素标记血红蛋白）定制合成技术

技术概述

FITC（荧光素异硫氰酸酯）是一种广泛应用于蛋白质标记的绿色荧光染料，可与蛋白质中的**胺基（主要为赖氨酸残基）特异性共价结合。将FITC与血红蛋白（Hb）**偶联，不仅能实现Hb在体内的可视化追踪，也可用于氧输运研究、光热治疗载体标记、蛋白转运示踪等方向。

合成工艺流程

1. 材料准备

血红色球蛋白（人源/牛源）FITC（易溶DMSO或碳酸盐缓存液）加载液：0.1 M 碳酸氢钠加载液，pH 9.0

2. FITC标记反应

将Hb溶解完于碳酸盐保护液中（1–10 mg/mL）。参加FITC液体（摩尔比FITC:Hb ≈ 10:1），背光的反应4–12 h，温暖把握在4°C。不良反应进程中适度打料，放置蛋白酶悠长岁月中。

3. 分离纯化

便用Sephadex G-25凝露过滤清洁柱或反渗透装置（10 kDa膜）清理未切合的FITC。可利用透析进一个步骤除掉小团伙。

4. 标记效率评估

用到太阳光的紫外线-内见光分光光度计检查测量280 nm（血清）和495 nm（FITC）释放。统计标记图片度：FITC/Hb摩尔比能让用荧光光谱分析（λ_ex=495 nm, λ_em=519 nm）查证荧光性能指标。

5. 储存条件

闭光、4°C维持于PBS或HEPES中，避免出现一直冻融。

技术亮点

FITC标上保存Hb空间结构和功能键，适用性于活体显像、组织细胞摄食研究方案。技艺平稳，是和大面积菌物符号光催化原理。可拓张为氧释放出来可视化数据研究分析机构。 

产自：绵阳pg电子娱乐游戏app 生物工程

作用：研发

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