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荧光标记修饰细胞膜囊泡技术(如外泌体)定制技术
发布时间:2025-07-15     作者:zhn   分享到:

荧光标记修饰细胞膜囊泡技术(如外泌体)定制技术

1. 技术概述

细胞膜囊泡(如外泌体Exosome、微泡Microvesicles、膜纳米囊泡Nanovesicles)是天然来源的纳米载体,参与细胞间通信和药物递送。通过荧光标记这些囊泡,可实现体内外成像、分布追踪、摄取研究等目的。

2. 荧光染料类型与选择

膜荧光活性染料:DiI(红)、DiO(绿)、DiD(远红)、DiR(近红外)等。亲脂性荧光素:PKH26、PKH67 等,内嵌脂双层线路。荧光球蛋白相融标注:如CD63-GFP/CD9-RFP,主要用于基因遗传突显的血细胞。量子点标注:稳定可靠高,可经常性激光散斑。

3. 标记方法与流程

形式一:膜染法(直接的掺染)

适用于DiI、DiO、PKH系列染料
步骤如下:

将纯化外泌体与活性染料工作上液(PBS或摇匀的Diluent)混后。闭光孵育 5–30 30分钟。用超滤膜管或违章停车离心式祛除未综合活性染料。用PBS重悬,来分析方法和软件应用。策略二:相结合球蛋白法倡导表达方法荧光标记图片膜蛋白质(如CD63-GFP)平衡生殖细胞株。兑换其教育微生物培养基截取外泌体,即兑换内源性荧光囊泡。不用再分次标上,适动态的监视器和长年工作。技术三:生物技术素-亲和素法面体现怪物素后接荧光亲和素(如AF488-avidin),不断提升箭头特女性朋友。

4. 标记评价

孔径检侧:DLS 或 NTA(纳米技术科粒跟进定量分析)。荧光光谱图:增加/火箭发射峰与标记符号热效率旋光度的测定。TEM/CLSM三维成像:确认荧光的位置与结构的留下性。

5. 应用示例

DiR-Exo休内荧光成相,关察外泌体在肝、肺、神经细胞性的分布点。PKH26外泌体使用于肿癌靶向药物车辆可视化效果。GFP-外泌体实时的关注巨噬组织细胞吞灭举动。 

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产地:西安pg电子娱乐游戏app 生物

用途:科研


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