荧光标记多肽底物定制技术-西安pg电子娱乐游戏app
生物
荧光标记多肽底物定制技术
一、概述
荧光标记多肽底物是一类在蛋白酶活性检测、信号通路分析、细胞成像等方面应用广泛的功能化分子探针。通过在多肽链N端或C端共价连接荧光团,可用于FRET探针、酶切底物、细胞摄取评价等。
二、定制技术路线
1. 多肽制成(固相制成法)所采用Fmoc固相炼制营销策略:应用氨基不饱和树脂膜蛋白镶嵌个人目标编码序列;管控链长(5~30个酪氨酸残基);高饱和度(>95%)经过HPLC纯化;特女性朋友酶切位点开发(如DEVD、RRR等)。2. 荧光修饰语较常用荧光染剂:FITC(异硫氰酸荧光素)Cy3/Cy5、FAM、TAMRA、Alexa Fluor 类别可制定为FRET对(如FAM-TAMRA)体现位点选择:N端氨基马上标志;东东助手按照链接搜索臂注入;中央倒入链接臂或分解位点(PEG linker、酶切位点)3. 管接头装修设计与双标记符号技艺的使用Lys侧链氨基或Cys巯基传入荧光标签;可构筑酶初始化失败型FRET结构设计,主要用于荧光面板开关探头;联系肽段与多肽探头期间实现PEG链挠性联系。三、定制参数与服务内容
工程 | 表明 |
多肽长宽 | 5–30 aa |
荧光染色剂 | FITC, TAMRA, Cy5, Alexa Fluor 等 |
遮盖位点 | N端、C互联网、Lys侧链等 |
酶加载失败性 | 可制定为MMP、Caspase、Trypsin等甄别底物 |
含量标准规范 | >95%,MS检测/HPLC报告单 |
交付使用形势 | 冻干粉/水盐溶液,带详细讲解书 |
四、应用方向
荧光影像检测器:用在内部摄食或定位系统论述;酶特异性检查:如Caspase-3、MMP特异性评定;FRET测试探针:主要用于蛋白酶信息交互分析;表现转导路径分析设计:是底物筛分辅助工具。涉及到强烈推荐:
FITC标识核血清激酶(即核血清激酶A(protein kinase A,PKA)FITC标识酪氨酸/苏氨酸蛋白酶激酶(RACα-serine/threonine protein kinase,Akt1))N6-甲基腺嘌呤的荧光符号FITC记号的卵清蛋白酶(FITC-OVA)朱红色荧光标出 Dil-Ac-LDL 刺绣FITC-WGA 绿化荧光标签麦胚凝集素 蛋白质判断硒核蛋白O(Sel O)的荧光标记符号物人绒毛膜膜促性腺刺激素(hCG)的荧光符号 FITC-hCG FITC-Gelonin,荧光箭头何首乌FITC/RhB@SilMA 微生物胺出现异常型水抑菌凝胶微针贴片