蛋白偶联肽定制技术介绍(Protein–Peptide Conjugation)
蛋白偶联肽定制技术(Protein–Peptide Conjugation)
1. 技术背景
蛋白偶联肽是通过化学或酶促手段将功能性多肽与天然蛋白(如BSA、HSA、OVA、KLH、抗体、酶等)进行共价偶联,以赋予肽分子免疫原性、靶向性或增强其生物学功能。该类偶联物广泛用于疫苗开发、抗体制备、诊断试剂、生物传感与药物递送系统等领域。
2. 可偶联蛋白种类
| 蛋白质类型的 | 最常见实例 | 软件应用导向 |
| 各种载体蛋白质 | BSA、OVA、KLH、HSA | 抗原设定、防疫针佐剂 |
| 酶类蛋白质 | HRP、AP、GFP | 显像标签、吸附性搜寻 |
| 抗体阳性类蛋白质 | IgG、Fab | 靶向疗法递送、免役组化 |
| 预警核蛋白 | TGF-β、EGF | 生物体活力激发 |
| 肾上腺素受体蛋白质 | Integrin、CD碳原子 | 神经元核靶点、神经元核摄取量 |
3. 常用偶联方式
| 偶联营销策略 | 基团符合要求 | 连接方式催化 | 特殊性 |
| EDC/NHS | -COOH 与 -NH₂ | 酰胺键 | 經典、相对稳定 |
| 戊二醛交连 | -NH₂ 与 -NH₂ | 醛胺缩合 | 温顺、广谱 |
| Maleimide–thiol | -SH 与 -Mal | Michael 加强 | 高的条件性 |
| Click 化学物质 | -N₃ 与 -C≡CH | Huisgen 环化 | 正交、更高效 |
| 碘代酰胺法 | 半胱氨酸位点符号 | 特异体现 | 优质位置 |
4. 多肽设计要求
连接管设计制作:常填加Gly-Gly、PEG₃等为主动公路桥梁效果位点曝光:减少关健位点被偶联影向端基掩盖:假如N/pc端接入Cys、Lys等偶联位点5. 偶联流程
多肽合成视频(SPPS):带某个淡化基团蛋清成功激活/突显:能够NHS化、Mal化、碘化治理 偶联生理反应必要条件调优:储存:PBS、MES、Borate等温暖:恒温或4℃影响此例:往往肽:淀粉酶=10:1 ~ 100:1纯化与印证:透析、SEC排除散布肽SDS-PAGE、质谱填写偶联6. 应用示例
OVA-RGD肽:适用T受损细胞滋养模式BSA-多肽抗原:提纯单克隆抵抗能力IgG-穿膜肽:受损细胞靶点递送食用的药物HRP-箭头肽:ELISA加测体系
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