蛋白偶联肽定制技术介绍(Protein–Peptide Conjugation)
蛋白偶联肽定制技术(Protein–Peptide Conjugation)
1. 技术背景
蛋白偶联肽是通过化学或酶促手段将功能性多肽与天然蛋白(如BSA、HSA、OVA、KLH、抗体、酶等)进行共价偶联,以赋予肽分子免疫原性、靶向性或增强其生物学功能。该类偶联物广泛用于疫苗开发、抗体制备、诊断试剂、生物传感与药物递送系统等领域。
2. 可偶联蛋白种类
淀粉酶型 | 实用例子 | 适用中心点 |
质粒载体蛋清 | BSA、OVA、KLH、HSA | 抗原方案、防疫针佐剂 |
酶类血清 | HRP、AP、GFP | 三维成像图标、特异性追综 |
抵抗能力类蛋白质 | IgG、Fab | 靶向治疗递送、免疫系统组化 |
走势蛋白质 | TGF-β、EGF | 动物活性酶提升 |
肾上腺素受体球蛋白 | Integrin、CD分子结构 | 肿瘤细胞系靶向疗法、肿瘤细胞系摄取量 |
3. 常用偶联方式
偶联思路 | 基团必须 | 衔接检查是否 | 作用 |
EDC/NHS | -COOH 与 -NH₂ | 酰胺键 | 经典的、增强 |
戊二醛化学交联 | -NH₂ 与 -NH₂ | 醛胺缩合 | 一个温和、广谱 |
Maleimide–thiol | -SH 与 -Mal | Michael 加持 | 高选泽性 |
Click 物理化学 | -N₃ 与 -C≡CH | Huisgen 环化 | 正交、便捷 |
碘代酰胺法 | 半胱氨酸位点标记符号 | 特异绘制 | 靶向市场定位 |
4. 多肽设计要求
连接头结构设计:常加盟Gly-Gly、PEG₃等算作槽式纽带功能性位点泄露:禁止重要位点被偶联会影响端基遮盖:需在N/PC版引用Cys、Lys等偶联位点5. 偶联流程
多肽组成(SPPS):带其他绘制基团蛋清激活码/遮盖:进行NHS化、Mal化、碘化处置偶联化学反应水平简化:储存:PBS、MES、Borate等热度:恒温的或4℃反馈比倒:基本上肽:核蛋白=10:1 ~ 100:1纯化与确认:透析、SEC洗除游离子肽SDS-PAGE、质谱确保偶联6. 应用示例
OVA-RGD肽:使用在T神经元滋养模式化BSA-多肽抗原:备制单克隆抵抗能力IgG-穿膜肽:細胞靶点递送食用的药物HRP-标出肽:ELISA探测系统软件产地:西安pg电子娱乐游戏app 生物
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