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β环糊精修饰环形核酸适体(cb-apt-βCD)用于增强功能蛋白递送研究
发布时间:2021-04-15     作者:axc   分享到:

环形核酸适体(cb-apt)是一类化学工程的适配体,具有优良的稳定性和分子识别能力,但是它在方面的应用依然受到挑战。

我们设计了一种β环糊精修饰的环形核酸适体(cb-apt-βCD),它与分子剂通过主客体化学的超分子相互作用,实现细胞内货物的靶向递送。**将分子容器β环糊精,共轭到单链sgc8核酸适配体上(靶向细胞表面的蛋白质酪氨酸激酶(PTK7));接着用一个互补的单链进行环化形成cb-apt-βCD。与单体核酸适体相比,这种超分子系统具有高的血清稳定性且能增强细胞内货物的传递效率。这种环形核酸适体运载绿色荧光蛋白(GFP)的效率高达80%,运载的毒性蛋白-皂草素能细胞的生长。

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图1  cb-apt-βCD的合成路径、与金刚烷修饰的蛋白之间的超分子相互作用及其介导的增强蛋白递送的示意图。**将分子容器β环糊精,共轭到单链sgc8核酸适配体上;接着用一个互补的单链进行环化形成cb-apt-βCD。其不仅能保持环形核酸适体高度的血清稳定性,还能封装疏水性的小分子或者金刚烷修饰的蛋白,形成一个超分子系统,增强细胞内的递送。

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图2  依据DBCO共轭和无铜鼠标点击反馈合出β环糊精掩盖语的单链核酸适体。依据高效液相色谱法破乳纯化能够 β环糊精掩盖语的单链核酸适体;采用互补原理链杂化衔接构成cb-apt-βCD ,可由性质发生变化pe塑料酰胺妇科凝胶电泳可确认。

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图3  将GFP看做一种摸式蛋白酶酶,生物体现上金刚烷。根据TMR-apt-βCD 和GFP-AdA的荧光共鸣能源转意转化率证明怎么写我们左右养成涉及到络合物。第二步一种符合物在血清中怎么样才能高安全稳定,为神经细胞内蛋白酶酶的货物运输打造了得到保障。

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图4  深入分享cb-apt-βCD介导GFP运送工具进受损内部的具体情况。可以通过脉冲光共整合受损内部影像实验室操作和免疫印迹分享实验室操作证明材料该分手后复合物能强烈进一步增强GFP的受损内部递送,且运送工具错误率更是高达80%。

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图5  研究该复合物运载功能蛋白-皂草素进细胞的情况。通过MTT检测方法证实cb-apt-βCD具有增强功能蛋白运载效率的性质。


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