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β环糊精修饰环形核酸适体(cb-apt-βCD)用于增强功能蛋白递送研究
发布时间:2021-04-15     作者:axc   分享到:

环形核酸适体(cb-apt)是一类化学工程的适配体,具有优良的稳定性和分子识别能力,但是它在方面的应用依然受到挑战。

我们设计了一种β环糊精修饰的环形核酸适体(cb-apt-βCD),它与分子剂通过主客体化学的超分子相互作用,实现细胞内货物的靶向递送。**将分子容器β环糊精,共轭到单链sgc8核酸适配体上(靶向细胞表面的蛋白质酪氨酸激酶(PTK7));接着用一个互补的单链进行环化形成cb-apt-βCD。与单体核酸适体相比,这种超分子系统具有高的血清稳定性且能增强细胞内货物的传递效率。这种环形核酸适体运载绿色荧光蛋白(GFP)的效率高达80%,运载的毒性蛋白-皂草素能细胞的生长。

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图1  cb-apt-βCD的合成路径、与金刚烷修饰的蛋白之间的超分子相互作用及其介导的增强蛋白递送的示意图。**将分子容器β环糊精,共轭到单链sgc8核酸适配体上;接着用一个互补的单链进行环化形成cb-apt-βCD。其不仅能保持环形核酸适体高度的血清稳定性,还能封装疏水性的小分子或者金刚烷修饰的蛋白,形成一个超分子系统,增强细胞内的递送。

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图2  依据DBCO共轭和无铜鼠标单击反响聚合β环糊精表达的单链核酸适体。依据色谱仪色谱法分开纯化达到β环糊精表达的单链核酸适体;充分利用相辅相成链杂化接出现cb-apt-βCD ,可由变形聚丙酰胺凝露电泳得知。

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图3  将GFP用于1个策略球淀粉酶,化学反应遮盖上金刚烷。根据TMR-apt-βCD 和GFP-AdA的荧光共震热量适当转移率證明两人两者之间产生一般包括络合物。再就是那样符合物在血清中可不可以间距稳固,为细胞核内球淀粉酶的搬家展示了后勤保障。

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图4  论述cb-apt-βCD介导GFP载重进人体神经元膜的时候。按照机光共集聚人体神经元膜三维成像實驗和流式的剖析實驗材料该复合材料物能显然加强GFP的人体神经元膜递送,且载重热效率更是高达80%。

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图5  研究该复合物运载功能蛋白-皂草素进细胞的情况。通过MTT检测方法证实cb-apt-βCD具有增强功能蛋白运载效率的性质。


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