SMCC化学交联剂偶联各种载体核蛋白KLH和多肽时
营养物质质热塑剂一类小原子有机物，还具有2个还是更加的重视特定基团（-NH2、-COOH、-HS等）的反应迟钝性端部，可不可以和2个又或者大多的氧碳原子对应偶联，为了使一些氧碳原子相结合在一起，进而确立共轭蛋清。
软件称呼：SMCC
详细资料：SMCC crosslinker (Succinimidyl-4-[N-maleimidomethyl]cyclohexane-1-carboxylate) is a heterobi-functional protein crosslinker with a maleimide group that is sulfhydryl (thiol; -SH) reactive and a NHS ester group that is amine reactive. The SMCC crosslinking reagent is permeable across the lipid bilayer of the cell membrane. The 9 atom spacer arm of SMCC is not cleavable.
Molecular Weight: 334.3
CAS #: 64987-85-5
Spacer Length: 8.3 Å
Alternative Names: 4-(N-Maleimidomethyl)cyclohexanecarboxylic acid N-hydroxysuccinimide ester;
好产产品称谓称：Sulfo-SMCC
Sulfo-SMCC crosslinker (Sulfosuccinimidyl-4-[N-maleimidomethyl]cyclohexane-1-carboxylate) is a water soluble, heterobifunctional crosslinker. Sulfo-SMCC crosslinking reagent has an 8.3 angstrom non-cleavable spacer arm and its maleimide group reacts with sulfhydryls (thiols), while the Sulfo-NHS ester is reactive toward primary amines. Sulfo-SMCC can be used to pro-duce antibody-protein crosslinked conjugates or efficiently label cell surface proteins.
Molecular Weight: 436.4
CAS #: 92921-24-9
Spacer Length: 8.3 Å
SMCC是一个类具有N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯和马来酰亚胺的双功能偶联剂.可以将分别含有巯基和氨基的化合物键接在一起。该交联试剂可渗透到细胞膜的脂质双层中，NHS生物酶类酯与伯胺在PH7-9的氛围组成酰胺键。马来酰胺与巯基在PH6.5-7.5的氛围下组成维持的硫醚键。在水盐溶液中，NHS生物酶类酯的油脂油脂水解是（与氨基的反映）个行业反映。马来酰胺比NHS维持，而且在PH大于等于7.5时，马来酰胺会缓缓油脂油脂水解，消失与巯基反映的炎症因子聊天。以至于，在用到SMCC时普通是在PH7.2-7.5的氛围下通过，并先让NHS会发生反映。
SMCC设备构造里的环己烷环就能够减少马来酰胺的淀粉水解传送速度。这会使球蛋白酶质使用SMCC遮盖然后就能够冻干摆放一截精力。大多数球蛋白酶质都采用该制剂来采取马来酰亚胺遮盖。
KLH (Keyhole Limpet Hemocyanin)，即血蓝血清质，是在任何软体各种软体动物、节肢各种软体动物(蛛蛛和甲壳虫)的血淋巴结中察觉到的属于存在的黄色呼吸系统天然色素。血蓝血清质含两个人随时衔接多肽链的铜化合物，与铁含的赤红血清质接近，它便于氧相依照，也易与氧解离，是相等的特别可与氧不可逆转相依照的铜血清质，钝化时呈青色色，备份时呈纯白色。其氧分子量45０ ０00～１30 000。因为KLH比BSA有更快的免疫细胞原性，进而是常被选用的质粒载体血清质。
用SMCC来制取抵抗能力-酶和半抗原创作品承载的蛋清质，时不时运用二步合并法。流程一，包含有氨基的蛋清质与多少倍的偶联剂化学发应，化学发应收尾后确认脱盐柱和透析的方案清除是没有化学发应完的SMCC。如果，再与具有刺激性巯基的营养物质质反應。在合理运行时需需要注意的是，SMCC怕潮气，停放时要和干燥处理剂混着停放。还有就是在使用中从电冰柜掏出时要先在室内搭建一条时光稳定平衡温度因素，免得即刻关掉，自然空气地下水分受冷结晶，受损SMCC 结构特征。
1、 将 20 mg SMCC（这连接起来40条多肽的量）不溶2 ml DMF。
2、 将0.8 ml KLH加入到到25 ml圆底烧瓶中，补加1×PBS(pH 7.2)使淀粉酶终有机废气浓度为 15 mg/ml。
3、 将融解好的SMCC硫酸铜溶液过慢中滴加到120 mg KLH 血清采集体系中，恒温打料发应1h。
4、 用1 L 1×PBS (PH 7.4) 溶剂于4℃下透析 6 时间，消除游离于的SMCC。
5、 将透析后的KLH淀粉酶装50 ml离心法式分液漏斗，进行离心法式管的刻度盘来确定其球体积，只能根据发生反应前加进的KLH球淀粉酶的量来计算方法透析后球淀粉酶的溶度，以后据其溶度将2.5 mg KLH-SMCC溶剂适当转移到5 ml离心分离分液漏斗。
比如：反响前加进KLH血清的量为120 mg，透析后的KLH蛋白酶密度为20 ml，那些透析后的KLH球蛋白浓 μl KLH-SMCC氢氧化钠溶液转让到5 ml离心分离管内。
6、 将 3.0 mg 多肽用 0.6 ml 1×PBS (pH 7.2) 溶剂融解。
要注意：现在多秤量出0.5 mg多肽是时用做ELISA监测的，拿出100 μl就可以了。测试多肽随交连好的抗原在一块寄出，有机废气浓度为5 mg/ml。
7、 用Ellman化学试剂在线检测多肽中的巯基：在96孔板里加入100 μl Ellman采血管收储液，加个入10μl多肽稀硫酸，用Nano分光光度计在λ=412 nm下测其红外光谱汲取值，若是OD值>0.15做 下的一步；OD值<0.15并>0.05补加多肽，难寻可达需要；OD值<0.05回到多肽制成方法步骤重拾质控。
Ellman化学制剂是用作检查游离子巯基的，假若检查液显土黄色代表多肽的Cys的巯基大局部以自由态存在的；如果的检测液不显黄则情况说明多肽Cys中的巯基都已经 被脱色达成二聚体或多聚体。
8、 将多肽液中滴加到KLH-SMCC管上，空调温度使用斜面混匀器混匀想法4每小时。
9、 用Ellman化学试剂查测多肽中的巯基：在96孔板添加入100 μl Ellman化学制剂贮备液，后加入10 μl 教官后的多肽硫酸铜溶液，用Nano分光光度计在λ=412 nm下测得分光光度计吸取值。OD值<0.03阐明多肽和KLH蛋白酶热塑率已高达80%及以上；OD值>0.03则再补加SMCC纯化好的KLH蛋清仍在交连。假若Ellman制剂显米黄色说明书多肽与KLH淀粉酶偶联不根本；如果Ellman制剂不显黄白色则详细说明多肽都全部都与KLH淀粉酶偶联。
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（一））：海洋生物素交联化学药品
Biotinylation Reagents生物学素化化学药品
Sulfo-NHS-Biotin CAS Number: 119616-38-5
NHS-Biotin CAS Number: 35013-72-0
Sulfo-NHS-LC-Biotin CAS Number: 127062-22-0
NHS-LC-Biotin CAS Number: 72040-63-2
Sulfo-NHS-SS-Biotin CAS Number: 325143-98-4
NHS-SS-Biotin CAS Number: 142439-92-7
Biotin Hydrazide CAS Number: 66640-86-6
Biotin-HPDP CAS Number: 129179-83-5
Iodoacetyl-LC-Biotin CAS Number: 93285-75-7
（二）Heterobifunctional Crosslinkers异形双性能交连剂：
SMCC Crosslinker CAS Number: 64987-85-5
Sulfo-SMCC Crosslinker CAS Number: 92921-24-9
Sulfo-SANPAH Crosslinker ; CAS Number: 102568-43-4
SMPH Crosslinker
PDPH Crosslinker
MBS Crosslinker CAS Number: 58626-38-3
Sulfo-MBS Crosslinker
SPDP Crosslinker ; CAS Number: 68181-17-9
LC-SPDP Crosslinker
Sulfo-LC-SPDP Crosslinker
SIA Crosslinker CAS Number: 39028-27-8
SBA Crosslinker CAS Number: 42014-51-7
SMPB Crosslinker CAS Number: 79886-55-8
BMPS Crosslinker CAS Number: 55750-62-4
EMCS Crosslinker ; CAS Number: 55750-63-5
GMBS Crosslinker CAS Number: 80307-12-6
ANB-NOS Crosslinker CAS Number: 60117-35-3
Homobifunctional Crosslinkers同型双效果热塑剂：
BS3 Crosslinker CAS Number: 82436-77-9
DSS Crosslinker CAS Number: 68528-80-3
BS2G Crosslinker
DSG Crosslinker CAS Number: 79642-50-5
DSP Crosslinker CAS Number: 57757-57-0
DTSSP Crosslinker CAS Number: 81069-02-5
Sulfo-EGS Crosslinker CAS Number: 167410-92-6
EGS Crosslinker CAS Number: 70539-42-3
DST Crosslinker CAS Number: 62069-75-4
Zero-Length Crosslinkers - EDC-HCl, Sulfo-NHS & NHS：
EDC-HCl CAS Number: 25952-53-8
Sulfo-NHS CAS Number: 106627-54-7
Deuterated Crosslinker BS3-d4
Deuterated Crosslinker BS2G-d4
Deuterated Crosslinker DSS-d4
（三）：Protein modification regents （核蛋白突显对应免疫试剂）
Protein Modification Reagents 胆固醇质表达剂：
SATA Protein Modifier
N-Succinimidyl-S-Acetyl-Thioacetate
CAS Number: 76931-93-6
Sulfo-NHS-Acetate
CAS Number: 152305-87-8
Traut's Reagent
CAS Number: 4781-83-3
HPG
CAS Number: 24645-80-5
Iodoacetic Acid
CAS Number: 64-69-7
BMPA Modifier
CAS Number: 7423-55-4
（四）Immobilization Resins一定化硅橡胶
Immobilization Resins统一化硅橡胶
Amino-Reactive Resin
Sulfhydryl-Reactive Resin
Carbohydrate-Reactive Resin
Carboxyl-Reactive Resin
Immobilized Pepsin
Immobilized Chymotrypsin
【交连剂的应运】：
细胞系膜结构特征研究方案
血清质结构特征实验
球营养物质间互不效果研究方案
生物学科学研究（靶向疗法**）
承载蛋白质与半抗原的接触
蛋白酶质或相关大分子的固相化
抗体阳性的箭头、箭头转变
核氨基酸与核酸的联接
血清质淡化等
【选用交连剂应考虑的影响因素】：
反應特异形
的反应跳转到性
间臂尺寸性
水可溶性
透膜性
其中一种或每种现象基团
热化学反映都是光电科技化学反映
能不能切段
可以不可以碘标
【可与热塑剂现象的基团】：
徘徊氨基（赖氨酸ε或N末端的氨基）
巯基（半胱氨酸）
羧基（天冬氨酸，谷氨酸，后部羧基）
羟基（丝氨酸或苏氨酸）
酮基，醛基，糖链
苯酚双重性物（苯丙氨酸，色氨酸，酪氨酸）
放射学性基团: R-N3
上文源于这里zhn2020.10.30
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