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荧光标记多肽(不同序列号的多肽)
发布时间:2020-09-14     作者:zhn   分享到:

荧光图标多肽(区别字段号的多肽)

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一、什么样是荧光标志?

荧光标上所依赖关系的无机有机化合物被称为荧光材质。荧光材质是说兼有共轭双键标准体系普通机械格局的无机有机化合物,感受到紫外线光或蓝紫采光射时,可鼓励变为鼓励态,当从鼓励态恢愎基态时,发送荧光。


二、荧光标识的位点

荧光记号有机物可同时和多肽的N端同时相互链接(如异硫氰酸荧光素的链接, 一般来说在多肽的N端和异硫氰酸荧光素同时插某个氨基乙酸或 β-丙氨酸。),或 在pc端和赖氨酸(或半胱氨酸)的侧链链接、或 在沒有可链接的座位链接。


三、荧光图标的例子

1. FITC修饰多肽:
 
异硫氰酸荧光素(FITC)含有较为高的活性酶类,往往来说就,在固相组成环节中 中对接这荧光基团相较于另一个荧光素要更简易 ,或者化学反应环节中 中不需用添加产甲烷免疫试剂。


FITC修饰的多肽通常主要有两种形式:
(1)在整条肽链N端接入FITC,并且在FITC之前接入一分子的Acp(6-氨基己酸),也称烷基间隔器。反应中FITC与肽链上裸露的-NH2反应,Acp的接入提供了六个碳的直链空间,大大降低了反应的空间位阻,提高了反应效率,降低了反应难度。其次,FITC还与多肽结构中的-SH,侧链-NH2反应,Acp的加入也降低了这种副反应发生的可能。此外,多肽在酸性环境条件下切割时,在N端接入FITC的多肽需要经历环化作用来形成荧光素,这种过程通常都会伴随一个氨基酸的切除,而烷基间隔器Acp的接入就避免了这一情况的发生。

(2)在整条肽中的某个Lys侧链接入FITC,Lys侧链为末端为-NH2的四碳直链烷基,直接起到了降低空间位阻的作用。这种修饰方式能够灵活的在整条肽中任何位置进行FITC修饰,而不仅仅局限于末端。


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2. 香豆素AMC修饰

7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)是一种荧光标记试剂,例如,酶的痕量测定,酶的鉴定,激光染料的制备等多种用途,此外,C端用香豆素修饰的泛素分子也是研究蛋白质泛素化过程的重要探针。

与其他荧光染料不同的是,AMC修饰多肽分子是从C端进行:(1)AMC与肽链C端的一个氨基酸反应;(2)固相合成整条肽链(从**个氨基酸开始),并且保留整条肽链的侧链保护基和一个氨基保护基;(3)液相缩合AA-AMC与全保护的肽链;(4)切除保护基,完成肽链的修饰。

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3. 5-FAM突显

一般 用做皮秒激光共焦聚高倍显微镜和流式的受损细胞方法的操作。

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4. Rhodamine B(罗丹明 B)绘制

罗丹明B是很多罗丹明染剂中的其中一种,适用荧光测定法。

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5. 5-TAMRA 遮盖

5-TAMRA是使用于标记图片肽和蛋白酶质的留行的蓝绿色荧光团之四。

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6. Cy 3和 Cy 5绘制

Cy3 and Cy5 是高消光指数公式的纺织染料。但是,以至于特别的适用性于受损细胞内的多肽确定实验英文。以至于的瑕疵是在多肽炼制视频的环境中十分的的不保持稳定,但是炼制视频的量相对于低。



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