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H2DCFDA (DCFH-DA) | 一种可渗透细胞的用于检测细胞内活性氧 (ROS) 的探针 使用说明书(包含活性氧检测原理和步骤)
发布时间:2021-11-11     作者:zhn   分享到:


H2DCFDA (DCFH-DA) 是种可融于细胞核核的,适用判断细胞核核内几丁质酶氧 (ROS) 的检测器 (Ex/Em=488/525 nm)H2DCFDA (DCFH-DA) 别称有以下的叫法:

DCFH-DA 抗逆性氧ROS荧光电极

英文字母品牌:2′,7′-Dichlorofluorescin diacetate

DCFH-DA,羟基优质基测试探针,cas4091-99-0

活力氧荧光测试探针(DCFH-DA)

H2DCFDA(DCFH-DA)

2',7'-二氯荧光素二乙酸酯

2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯

2′,7′-Dichlorodihydrofluorescein Diacetate

DCFH-DA 活性氧氧ROS荧光探头

2',7'-DICHLOROFLUORESCIN DIACETATE, FOR FLUORESCENCE

2-(2,7-Dichloro-3,6-diacetoxy-9H-xanthen-9-yl)benzoic acid

DCFH-DA, ROS 检测器

体细胞内灵活性氧查重检测器DCFH-DA

H2DCFDA(DCFH-DA)就是种代用的被氧化应激反应的指示剂

H2DCFDA (DCFH-DA) 几丁质酶氧(ROS)荧光探头

DCFH-DA提高吸光度

DCFH-DA氧分子量

DCFH-DA亲水性氧探测操作过程和工作步骤

灵活性氧荧光电极(DCFH-DA),H2DCFDA,ROS荧光电极

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DCFH-DA适用原因分析书:

本品以粉沫行驶提供数据,可简单混溶无水DMSO配制成1-10mM储存液,常用工作浓度1-10μM,需根据自身的实验体系或参考文献进行优化。
主要是产品参数:
CAS NO:4091-99-0
原子式:C24H16Cl2O7
大分子量:487.29
色度:≥97%
表面:紫色-带茶色凹凸感的紫色咖啡豆
分解性:不溶DMSO(25mg/ml)、DMF(25mg/ml)、无水乙醇(25mg/ml)
结构设计式:
H2DCFDA (DCFH-DA)

保留:-20oC避光干燥保存,-少2年。

考虑地方:
1.生产容剂如DMSO会自动储存液需包装成一次用药量后,-20oC阴凉存放,应对出现冻融。
2.为着您的和安全健康,请穿实践服并戴一下性手淘控制。

运用方案:
以上步骤之一是从何而来于多医学文献总的的简单的操作的工艺流程,仅作参考使用。使用者需选择指定的用和敏锐性来做优化。
1.将高低温包存的冻干粉拿出回-空调温度,中速离心力使粉沫飘落在瓶底。之前参加适度无水DMSO或其它的有机化学相转移催化剂调制成1-10mM贮藏液。未用完的DMSO贮藏液需散装并遮光冻具有-20℃,防止反复不断地冻融。
2.于已正式试验前,用身体盐缓存数据液(举个例子来说:PBS,HBSS,HEPES)溶解到做办公酸度值1-10μM。需据重要运用来更改合适的的做办公酸度值。
3.抽走的培养液,成为具体步骤2)配好的凉茶的固色本职工作液到神经细胞内,室内温度或30℃孵育5~60min。
4.抽走复染工作的液,用暖机的内分泌系统缓存数据液或组织体组织细胞核培养教育教育液家电清洗一百遍。再一次融入暖机的内分泌系统缓存数据液或组织体组织细胞核培养教育教育液,在合适摄氏度内孵育。面对二乙酸酯衍化物,需短时平复时让组织体组织细胞核内酯酶将其水解反映,导致让纺织染料对氧化反映应激性所产生反映。佳的平复时区域很广,是因为任何组织体组织细胞核方式一般是表示**低技术的酯酶几丁质酶。
5.将受损癌细胞裸露于工作激励物先前,先测得数据加载受损癌细胞的时代背景荧光程度。
6.按照下事情开展阴性化比(Negative control),
①红色发光谱分析内全面检查未染色剂内部的自荧光的情况。
②针对流式細胞定性分析,核实颜料添加和加工治理 后細胞的前向角散射和侧向角散射也不变。細胞尽寸的不同概率与起泡或衰退有关的,随着加工治理 或含毒响应引致的。
③对包涵了和不包涵了有趣物的染色剂和缓冲液/训练基的无组织质量分数物确定荧光检测工具。在富含组织外酯酶和各种脱色酶的的情况下,根据时荧光的日趋增高也许与一刹那电离、空气的脱色、和/或光分析脱色光于。
④排查教育培训在发育教育培训液或单纯保护液内的未外理添加组织系膜(比对)的荧光。在身体稳定可靠组织系膜内,组织系膜内酶和/或抗阳极防钝化剂会清理掉这样的氧随意基。路过染剂添加恢复日子后,身体稳定可靠组织系膜该呈现出低标准的荧光走势,且在整块实验英文一年后相稳定可靠。可是,越来越加入(致使自阳极防钝化)或降底(致使组织系膜内染剂失去了或光淬灭)亦有将仔细观察到。在中含一切刺击物或引诱剂的标准体系内,身体稳定可靠和未外理组织系膜无缘无故出现 强荧光,表达组织系膜形成去世或很多其余的阳极防钝化案件。
7.确立抗体阳性剖析,有可能对其进行留言板法敏感腐蚀可溶性:
①推动剂(PMA,运行溶液浓度100pM~10μM)
② H2O2或TBHP(终酸度~100μM)(会按照神经细胞本质上对其的快速度和想法性来加强或大大减少酸度)
8.保证充分调动**或化学物质不容易引发的纺织活性染料荧光淬灭。查检化学物质的获取光谱图图,决定化学物质的获取峰不容易与阳极氧化后纺织活性染料的大充分调动或反射光谱图图情况叠加。

 H2DCFDA (DCFH-DA)

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在分光光度计-看得见-近红外区有本质特征荧光,以及其 荧光质地(充分调动和发射卫星吸光度、 抗拉强度、人类寿命、 偏振等)随同发生变化环镜的质地,如正负极、折射率率、动力粘度等变更而迅敏地变更的些荧光性大分子。

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