DSPE-PEG2k-Biotin，二硬脂酰磷脂酰酒精胺-聚乙二醇2000-微生物素偶联物的合成步骤概述

中文名称：二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-生物素偶联物
英文名称：DSPE-PEG2K-Biotin (1,2-Distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-PEG2000-Biotin)

合成步骤概述：
DSPE-PEG2K-Biotin 是通过将 DSPE-PEG2K 与生物素（Biotin）偶联形成的多功能分子。该分子具有疏水的 DSPE 脂质段、亲水 PEG 链以及末端功能化的生物素，可用于脂质体修饰、纳米颗粒功能化及生物分子标记。其合成步骤主要包括偶联反应、纯化和表征三个环节。

1. 原材提供与滋养
• DSPE-PEG2K-NH₂ 或 DSPE-PEG2K-MAL 是常见的偶联前体。两者末段为氨基，由是末段为马来酰亚胺。
• 海洋菌物素衍海洋菌物：常食用 NHS-活性海洋菌物素（Biotin-NHS）或巯基海洋菌物素（Biotin-SH）并能与 DSPE-PEG2K 的末梢功能键团现象。
• 在偶联前，辅料需溶水于潮湿有机酸溶液（如 DMSO、DMF）或加载液中，为了保证体现区域环境无水和无氧，以提高副体现。
2. 偶联影响
• 酰胺化偶联：若实用 DSPE-PEG2K-NH₂ 与 Biotin-NHS 现象迟钝，氨基对 NHS-产甲烷怪物素的羧基撤销亲核进入主题，添加不稳定性的酰胺键。现象迟钝在弱典型的含碱减慢液（pH 7.5–8.5）中开始，空调温度下现象迟钝数一小时至包夜以维持充沛偶联。
• 巯基偶联：若便用 DSPE-PEG2K-MAL 与 Biotin-SH 反映，马来酰亚胺与巯基行成相对稳定的硫醚键，反映温暖、快速的，一般是在制冷下成功完成。
3. 纯化步
• 偶联化学反应迟钝结束之后，实现透析、疑胶过滤器或蛙胶柱层析祛除未化学反应迟钝的菌物素和小碳原子副产品。
• 纯化后的代谢物一般来说互溶缓冲区液或无机混合型液体中，并可经由冻干或超高温贮存以提高平稳性。
4. 表现与校验
• 核磁振动（NMR） 应用在认定 DSPE-PEG 链和动物素的结构。
• 质谱（MS） 可较准检验偶联物质的氧分子量，验证通过偶联速度。
• 薄层色谱（TLC）或效率高高效液相色谱（HPLC） 也可以于檢查的反应达到实际情况和纯净度。

总结：
DSPE-PEG2K-Biotin 是通过 DSPE-PEG2K 与生物素在温和条件下共价偶联形成的多功能脂质-PEG-生物素分子。其合成主要包括活化原料准备、酰胺化或巯基偶联反应、纯化去除副产物以及结构和纯度表征。该偶联分子广泛应用于脂质体修饰、纳米颗粒功能化和生物标记研究，为靶向递送和检测实验提供可靠工具。

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