Mal-PEG4-NHS ester，马来酰亚胺-聚乙二醇₄-NHS 酯的制成时

Mal-PEG₄-NHS ester 的中文名称通常为马来酰亚胺-聚乙二醇₄-NHS 酯，也可称为PEG₄ 链马来酰亚胺活性酯。其中，Mal 表示马来酰亚胺官能团，可与蛋白质或多肽的巯基（–SH）发生特异性共价偶联；PEG₄ 表示由四个乙二醇单元组成的柔性链，提供水溶性和空间延展性；NHS 酯（N-hydroxysuccinimide ester）为活性酰基，可与氨基（–NH₂）反应形成稳定的酰胺键，实现多分子或多功能修饰。该化合物广泛用于蛋白质、寡核苷酸及药物分子功能化修饰。

二、镶嵌过程中

1. PEG₄ 链官能化
   从羟基末端的 PEG₄ 二醇或羧基 PEG₄ 出发，对一端进行马来酰亚胺保护或连接，使 PEG₄ 链两端分别具备马来酰亚胺和羧基活性位点，为后续偶联提供空间延展性和选择性反应。

2. NHS 酯化反应
   将 PEG₄ 链的羧基端与 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）反应，通常在存在 DCC（N,N'-二环己基碳二亚胺）或 EDC（1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺）作为活化剂的有机溶剂（如二氯甲烷或 DMF）中进行。此步骤生成活性酯，形成 Mal-PEG₄-NHS ester 的关键中间体。

3. 反应条件
   合成过程在无水、避光条件下进行，以防止马来酰亚胺的水解或自偶联。反应温和，一般在室温下搅拌数小时至完全反应，同时监测反应进度。

三、纯化进程

1. 去除副产物
   反应完成后，通过过滤或旋转蒸发去除沉淀的 DCC 副产物（如 DCU）及溶剂残留。

2. 色谱纯化
   使用硅胶柱层析或反相高效液相色谱（HPLC）分离 Mal-PEG₄-NHS ester 与未反应的 PEG 链、马来酰亚胺副产物及残余活化剂。通常以有机溶剂梯度洗脱获得纯品。

3. 检测与储存
   纯化产物可通过核磁共振（¹H NMR）、质谱（MS）及红外光谱（IR）确认结构和纯度。为了保持马来酰亚胺活性，纯品应冻干储存或溶于无水溶剂中，避光低温保存。

四、总结
Mal-PEG₄-NHS ester（马来酰亚胺-聚乙二醇₄-NHS 酯）是一种功能性多官能化分子，具有马来酰亚胺可与巯基偶联、NHS 酯可与氨基反应以及 PEG₄ 链提供的水溶性和空间延展性。其合成过程包括 PEG₄ 链官能化、NHS 酯化及温和条件下偶联反应，纯化过程通过柱层析或 HPLC 去除副产物并保证活性。该试剂广泛应用于蛋白质标记、药物修饰、寡核苷酸功能化及多功能分子构建，为生物化学和分子工程研究提供可靠工具。

产品名称：Mal-PEG4-NHS ester

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