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Cy5.5 Tyramide Conjugates,Cy5.5酪胺偶联物的制备方法
发布时间:2025-12-17     作者:axc   分享到:

Cy5.5 Tyramide Conjugates,Cy5.5酪胺偶联物的制备方法

2英文分类:Cy5.5酪胺偶联物

描述:
Cy5.5 Tyramide Conjugates 是一种将近红外荧光染料 Cy5.5 与酪胺(tyramide)分子共价偶联的功能性标记试剂,常用于高灵敏度生物标记和成像。Cy5.5 是一种近红外荧光染料,其激发波长约为675 nm,发射波长约为694 nm,具备低背景自发荧光、高光稳定性和穿透深度强的特性。酪胺基团在过氧化物酶(如HRP)催化下可生成高反应性自由基,与靶标蛋白质或芳香族基团形成稳定的共价键,实现靶标的局部高密度标记。Cy5.5 Tyramide Conjugates 在免疫组织化学(IHC)、免疫荧光(IF)、核酸探针标记及药物递送系统追踪中广泛应用。

制备方法:
Cy5.5 Tyramide Conjugates 的制备主要包括荧光染料活化、酪胺偶联和纯化几个关键步骤:

  1. 荧光染料活化
    Cy5.5染料通常以羧基衍生物形式提供。在制备过程中,羧基通过N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)或类似活化剂形成活性酯,使其能够与酪胺分子的氨基高效偶联。活化步骤通常在有机溶剂(如二甲基甲酰胺 DMF 或二甲基亚砜 DMSO)中进行,并在弱碱性缓冲体系(pH 7.5-8.5)下操作,以确保活性酯稳定且反应效率高。

  2. 酪胺偶联
    将活化的Cy5.5 NHS酯与酪胺分子中的氨基反应,形成稳定的酰胺键,实现荧光染料与酪胺的共价连接。偶联反应通常在温和条件下完成,避免染料降解或副反应产生。通过优化摩尔比和反应时间,可以提高偶联效率,获得高纯度的Cy5.5 Tyramide Conjugates。

  3. 纯化与缓冲转移
    偶联反应完成后,采用高效液相色谱(HPLC)或凝胶过滤方法去除未反应的Cy5.5、酪胺及副产物。纯化后的偶联物可溶解于适合实验使用的缓冲液中(如PBS或Tris缓冲液),进行冻干或冷冻保存。纯化步骤保证了试剂的高纯度和稳定性,适合后续生物标记应用。

  4. 质量控制与验证
    最终产物需通过质谱(MS)或高效液相色谱分析确认偶联成功及纯度。此外,荧光光谱检测可验证Cy5.5的激发和发射特性,确保标记性能符合实验要求。

  5. 储存条件
    Cy5.5 Tyramide Conjugates 应储存在避光、低温(-20°C)条件下,避免反复冻融,以保证长期稳定性和荧光强度。

借助这布骤制作的Cy5.5 Tyramide Conjugates 体现了高溶解度、高保持比较稳定量分析和可以操控的的偶联形态,都可以在HRP催化氧化必要条件下高效化图标图片靶标蛋清或核酸,带来简约明亮、保持比较稳定的近红外荧光无线警报。其制作技术依照了颜料纯化、酪胺偶联和纯化检证,为實驗设计带来了靠谱的工具,可广泛的采用于公司影像、丰富图标图片、无线警报图像放大和抗癫痫药物递送保障体系的可视化分析设计。

产品名称:Cy5.5 Tyramide Conjugates 

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Cy5.5 Tyramide Conjugates

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