CAL Fluor Gold 540 Phosphoramidite,CAL 荧光金 540 磷酰胺衍生物的化学合成手段

CAL Fluor Gold 540 Phosphoramidite（中文名称：CAL 荧光金 540 磷酰胺衍生物）是一种用于固相寡核苷酸合成的功能化荧光核苷酸中间体，其核心为 CAL Fluor Gold 540 荧光染料，通过柔性链与核苷骨架连接，并在末端引入 2-氰乙基二异丙基磷酰胺（phosphoramidite）官能团，使其可在固相寡核苷酸合成中高效偶联。CAL Fluor Gold 540 属于黄-橙色荧光染料，吸收峰约在 540 nm，发射峰约在 560 nm，具有高量子产率、良好光稳定性及水溶性优异，适用于寡核苷酸标记、分子探针、荧光成像和多重标记实验。

CAL Fluor Gold 540 Phosphoramidite 的提纯工艺常其中包括这几个核心步数：荧光染色剂模块化、柔软性链连结已经磷酰胺化滋养。关键在于，将 CAL Fluor Gold 540 荧光染色剂经过羧基或氨基官能团做滋养，常选取 N-羟基琥铂酰亚胺（NHS）滋养或别适当滋养剂出现活性氧中心体。滋养后的染色剂可与具有胺或羟基的长链柔软性连结基（如 C6、C12 链）会再次发生偶联反映，转变成染色剂-链连结物。该反映在干澡的设计溶液中做，常引入酸性离子液体剂（如 DIPEA）以提高网站偶联，并调控水温和反映时以防止止染色剂光降解或副反映会再次发生。其二，将活性染色剂-链偶联物与核苷骨架构建，一般采用 5'-羟基商品详情页胸腺嘧啶或另外的核苷。在晾干有机会萃取剂中，能够碱状态催化剂的作用，活性染色剂-链与核苷羟基成型共价键，导出固定的活性染色剂-核苷偶联物。该流程保障活性染色剂与核酸链有条定的前景隔離，减轻荧光淬灭和碳原子间不干扰，与此同时保护核酸二级考试结构类型的详尽性。到最后，将纺织染料-核苷偶联物做好磷酰胺化净化处理，获取 2-氰乙基二异丙基磷酰胺活力性基团，确立 CAL Fluor Gold 540 Phosphoramidite。磷酰化现象迟钝一样 性在干二氯甲烷气体或 DMF 中做好，并入驻碱（如 DIPEA）以阻止现象迟钝存在的 HCl，现象迟钝高温一样 调控在 0–5°C，以降低副现象迟钝危险 。磷酰胺化达到后，经纯化（如硅胶材料柱层析或 HPLC 剥离 ），赢得高溶解度的 CAL Fluor Gold 540 Phosphoramidite，可在固相人工中间接应用在寡核苷酸箭头。配制的过程 中应小心纺织染剂的光刺激性性和磷酰胺对水的刺激性性。全部操作的应在背光水平下参与，并的使用常温、干燥液体以恢复化学物质平衡性。纯化后的结果应常温背光包存，不要水分侵入和阳极氧化区域环境，以绝对磷酰胺生物和荧光功效。后面结果有控制器化格局，荧光纺织染剂管理处、软性链同时终端磷酰胺的结构使其是可以在寡核苷酸转化成中高质量、可控硅调光地数据整合，并恢复光电器件功效平衡。

产品名称：CAL Fluor Gold 540 Phosphoramidite

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