1. ICG 的电学不稳明确性：ICG 在水相和太阳光因素下易有生挥发或自众多，诱发荧光程度下滑及显像性不不稳明确。需调控溶液、室温和太阳光因素以保持活性氧。
2. PEG 链粗度与容解性控制：PEG 链需要兼具到水无水磷酸氢、区域空间储存及偶联现象迟钝率，链过短应该从而导致容解特点差，链过多则后果现象迟钝渗透性或荧光特点。
3. 动物技术素偶联热效率：后部动物技术素的共价联系需以免与 ICG 客体的响应副效果，还提高动物技术素的可辨别性和感召力。
4. 有机会溶剂挑选与影响情况：ICG、PEG 和海洋生物素结构类型错综复杂，影响一般说来在有机会/水混合式组织体制中进行，需优化系统 pH、的温度和影响时长，以免止活性染料化学降解或PEG链平行影响。
5. 乙酰乙酸纯化：ICG-PEG-Biotin 乙酰乙酸的氧分子量更大，极容易形成了两组分混合着物，纯化大多数使用透析、柱层析或反渗透装置，实操复杂的且机会导致的荧光丢失。
6. 水阴离子型与聚集地间题：ICG 易自聚，PEG 链需展示有效手机屏蔽，一同逃避动物素端部彼此用途所致沉垫或比例失调一棵粒。

应用价值：
尽管制备存在挑战，ICG-PEG-Biotin 在靶向成像、分子识别和生物传感中具有独特优势：

• 近红外激光散斑：ICG 可以提供深机构穿过工作能力，需用于身体里即时探测。
• 生物学技术制品素-亲和意义：末段生物学技术制品素可与链霉亲和素或抗生物学技术制品素表面抗原特异切合，实现了靶向疗法阻止或的功能化媒介打造。
• PEG 链保护措施：增长内部无限循环期限和水阴离子型，缩减非活性朋友溶解和免疫检测去掉。