Alexa Fluor555-NHS,AF555-活性酯的合并的过程评述
Alexa Fluor 555-NHS(简称AF555-NHS)是一种水溶性荧光染料的活性衍生物,属于Alexa Fluor染料系列。其吸收波长约为555 nm,发射波长约为565–570 nm,具有稳定的荧光信号和较高的量子产率。AF555-NHS特别设计用于与含游离氨基的生物分子(如蛋白质、肽和多肽)发生共价偶联,从而实现荧光标记和可视化分析。AF555-NHS通过其NHS酯官能团提供高度反应性,使染料能够在温和条件下与目标分子形成稳定的酰胺键。
节构特征AF555-NHS的分子构造构造可可分成二个部门:荧光体系化、导电性表达基团和NHS活性酶类酯官能团。荧光核心
荧光核心通常为共轭芳香族或苯并呋喃环体系,提供稳定的共轭电子系统,实现高量子产率和耐光性。共轭体系的设计保证染料在紫外-可见光区域具有特定吸收峰和发射峰,使其适用于光学显微镜、流式细胞术和荧光成像等实验。极性修饰基团
为提高水溶性,AF555分子通常在核心结构上引入亲水性侧链或离子性基团,如磺酸盐、羟基或羧基。这些修饰基团不仅增强染料在水溶液中的分散性,还减少聚集和非特异性吸附,提高生物实验中标记的可靠性。NHS活性酯官能团
分子末端的NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)酯为活性位点,可与生物分子上的游离氨基发生亲核取代反应,形成稳定的酰胺键。NHS酯具有较高反应性,在弱碱性条件(pH 7.2–8.5)下能迅速发生反应,同时避免水解导致的产物损失。
荧光核心构建
荧光核心通常通过多步有机合成获得,包括芳香族环的偶氮化、环化及取代反应。该步骤的关键是建立稳定的共轭体系,保证最终染料具有所需的吸收和发射特性。合成过程中需要控制温度、溶剂体系和pH,以实现高收率和结构选择性。极性修饰
在荧光核心形成后,通过引入磺酸盐、羧基或其他亲水性官能团实现水溶性增强。这些修饰通常通过醚化、酯化或烷基化反应完成,确保染料在水溶液中稳定分散,同时不会显著影响光学性能。NHS活化
在羧基官能团上引入NHS酯,将羧基活化为易于与氨基偶联的形式。该步骤通常使用DCC(N,N’-二环己基碳二亚胺)或EDC(1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺)作为脱水试剂,将羧基转化为NHS酯。反应需在干燥溶剂和避光条件下进行,以防止水解和荧光损失。
产品名称:Alexa Fluor 555-NHS
含量:95%+遗传性状:胶体或夜体储存标准:-20°C干热背光导出内包装尺寸:50mg 100mg 250mg 500mg(按需给出)产品:pg电子娱乐游戏app 生物学


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