CY5-Protein-A，CY5标志的核蛋白A的作用原理

Cy5-Protein A 是一种通过荧光染料 Cy5 与蛋白A（Protein A）共价修饰形成的标记蛋白。Protein A 是金黄色葡萄球菌分泌的蛋白，能够高亲和力结合免疫球蛋白的 Fc 区域，因此在免疫学实验中常用于抗体纯化、免疫检测和分析。Cy5 是红色荧光染料，激发光波长约650 nm，发射光约670 nm，具有高荧光强度和稳定性。Cy5-Protein A 的形成使 Protein A 具备可视化功能，可用于免疫检测、细胞成像及结合实验。

有机化学构成特证Cy5-Protein A 由好几部分组名称成：

1. Protein A：血清质骨架具有刺激性各种生理反应性氨基、半胱氨酸等官能团，用于为共价体现位点。Protein A 的 Fc 通过效果易受过度物理化学体现引响，可实现其通过性能指标。
2. Cy5 荧光染剂：Cy5 常常以 NHS 酯结构发生，也能与球蛋白的氨基达成安稳的酰胺键。Cy5 展示 红色的荧光数据信号，可以使用于一直观看 Protein A 的占比、结合在一起模式及免疫检测复合型物达成。

体现基理Cy5-Protein A 的共价图标主要依耐于氨基的亲核生理反应规则：

1. NHS 酯产甲烷：Cy5 荧光染剂尾部依据 N-hydroxysuccinimide（NHS）行成产甲烷酯，电子技术一些缺陷使其对亲核生化试剂格外敏感，格外是蛋白质含量质赖氨酸残基上的氨基。
2. 亲核攻占：Protein A 上的氨基在酸碱度缓冲器情况下症状为未质子化的亲核风格，可攻占 Cy5-NHS 酯的羰基碳，行成中作为衔接态。
3. 酰胺键建立：经历过质子迁移和离去基团降低，NHS 被以旧换新，氨基与羰基建立不稳的酰胺键，完成 Cy5 与 Protein A 的共价依照。
4. 国家宏观调控修饰语层次：能够 缓解 Cy5-NHS 与 Protein A 的摩尔比、反馈时和 pH，稳定制标注黏度，确保安全蛋白酶相结合生物和荧光数据信息兼备。

实验所要求经典表现在 pH 7.5–8.5 的大幅度降低液中展开（如 PBS），清新的恒温条件下攪拌数小時，以以免 核苷酸质男变女或 Cy5 光稳定可靠性大幅度降低。表现提交后，利用透析、反渗透装置或凝胶的作用滤水剔除未表现的 Cy5，达成纯化标注货物。

产品名称：Cy5-Protein A

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