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FITC-Phalloidin的实验操作要点
发布时间:2025-11-27     作者:wyh   分享到:
新产产品公司名称称:FITC-Phalloidin的实验所进行关键1. 型式与的原理Phalloidin:出自于毒鸡油菌Amanita phalloides的环状七肽毒物,以高判断力(Kd≈20 nM)决定性融合丝状肌动蛋清(F-actin),不融合聚己内酯肌动蛋清(G-actin),可安全稳定微丝设备构造并限制其解聚。FITC:荧光标识物,增强主波长495-496 nm,释放深绿荧光(513-516 nm),配适荧光显微镜的FITC工作区。软型物特点:大分子量约1177.3 Da,水可溶,半径约12-15 Å,对F-actin的特男人联系无动物群差异化,支持于动绿植的及微的微生物内部。2. 动物学用途目标的主要用途:标记符号神经癌受损细胞核骨架中的F-actin,使用通过观察神经癌受损细胞核形态特征、gif变化规律(如伪足形成了、神经癌受损细胞核移动)、神经癌受损细胞核分裂主义及组织安排设备构造。实验报告3d场景:放置細胞/团队薄片(需甲醛超标或戊二醛放置,尽量不要甲醇影响肌动血清)。受损血细胞培養物、无受损血细胞采集体系(如纯化的肌动血清人造纤维)。多色荧光激光散斑(常与DAPI、TRITC等联用,标记符号细胞系核或某些结构特征)。定量定量分析定量分析:使用荧光难度评定F-actin含量,评估方法药剂/遗传基因对神经细胞骨架的印象。3. 工作操控思路永久保存与配好的凉茶:冻干粉或DMSO/甲醇液体手段,-20℃背光同步保存(能够期约1年时间内)。工做液氨水浓度一般说来为80-200 nM,需要用含1% BSA的PBS摇匀以减掉非特男人相结合。固色过程(常见工作流程):人体细胞固定的位置(4%多聚室内的甲醛,空调温度10-1分之五钟),以免甲醇固定的位置剂。透化操作(0.5% Triton X-100,五一分钟)。FITC-Phalloidin孵育(温度背光半小时左右,可提高酸度与时长)。洗條(PBS的清洗3次),封片(抗荧光淬灭剂+DAPI复染血细胞结构)。注意重大事项重大事项:Phalloidin有害(LD₅₀≈2 mg/kg),作业需戴毛织手套、穿实验报告服。尽量避免固定住剂含甲醇,解决肌动蛋白酶格局损害。工做液现配所用,防范频繁冻融。

FITC-Phalloidin

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