CAS号：2182601-71-2，Cy5-DBCO，Cy5-二环己烯炔荧光偶联化学试剂的制备方法

Cy5-DBCO 中文名称为“Cy5-二环己烯炔荧光偶联试剂”，其中 Cy5 表示远红荧光染料（激发波长约 650 nm，发射波长约 670 nm），具有高光稳定性和亮度；DBCO 为二环炔结构，可与叠氮官能团分子发生铜自由“点击”反应，实现高效率、特异性的标记。该试剂通常为活性衍生物，用于构建荧光标记蛋白、寡核苷酸或其他生物大分子。

化学组成与特性
Cy5-DBCO 由两部分组成：

1. 荧光染色剂局部（Cy5）：Cy5 归属于氰基偶氮染色剂（Cyanine dye），其共轭结构的确立远红荧光优点，兼具较高的量子成品率和光热稳定性分析性，可在多色荧光三维成像中算作远红通路标出。
2. 作用官能团（DBCO）：DBCO 就是种环力值较高的二环炔，就可以与叠氮基团很快突发环增益作用（SPAAC），作用不同铜爱情催化剂的作用剂，避开铜阴阳离子对怪物原子（如高蛋白质或内部）的暗藏毒素。Cy5-DBCO 在安全的酰胺或碳链与有机染料相连接，兼备化学物质安全性和作用活性酶类。

制备方法
Cy5-DBCO 通常通过化学偶联的方法制备，可分为以下步骤：

1. 主要原料预备

• Cy5-NHS 酯或 Cy5-灵活性羧酸具象化物
• DBCO-胺（DBCO-NH₂）
• 烘干有机的液体（如 DMSO 或 DMF）
• 加载标准：有利于用缺水的碳酸盐加载液或三乙胺（TEA）最为酸碱度环镜以力促酰胺键组成

1. 偶联生理反应

• 将 Cy5-NHS 酯溶水于干躁石油醚中，申请加入 DBCO-NH₂ 的摩尔过度，使氨基与 NHS 酯的发生亲核加强，制成 Cy5-DBCO 的酰胺键。
• 生理发生反应工作体系应阴凉，并在在常温或稍低一些温下用适当的力度轻轻混合，生理发生反应時间应该为数1天至過夜，以为了保证高生成率。

1. 反应迟钝摄像头监控

• 症状期间中可所采用薄层色谱（TLC）或快速色谱仪色谱（HPLC）实时监控偶联有机物行成及未症状底物的消费。
• 可依据荧光检查确定 Cy5 荧光信号灯具有，并过程判定标记图片吸收率。

1. 副产物纯化

• 化学的反应结束了后，确认热熔胶柱层析或反相高效益色谱仪色谱（RP-HPLC）拆分 Cy5-DBCO 副产物，出掉游离子 Cy5 或未化学的反应 DBCO。
• 纯化后的化合物基本上冻干同步储存或融解于皮肤干燥 DMSO 中吸收，遮光、常温同步储存以持续荧光灵活性。

1. 性验证通过

• 纯化后的 Cy5-DBCO 适用于实体模型叠氮化物原子的 SPAAC 发应验证通过。
• 可能够质谱、HPLC 或荧光光谱分析核定形式正確性、色度及荧光基本特性。

产品名称：Cy5-DBCO 

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