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​AF488-TSA,Alexa Fluor 488酪胺,反应原理
发布时间:2025-11-26     作者:axc   分享到:

AF488-TSA,Alexa Fluor 488酪胺,反应原理

AF488-TSA 属于酪胺信号放大(Tyramide Signal Amplification, TSA)系统的荧光底物。其核心结构由 Alexa Fluor 488 荧光团与酪胺分子通过化学键连接而成。酪胺可以在过氧化物酶(如 HRP, horseradish peroxidase)催化下形成高度活泼的自由基,能够与附近的芳香族氨基酸残基共价结合,实现靶分子的荧光标记。

反映远离常见属于以下的多个过程:
  1. 酪胺钝化:在留存过钝化氢(H₂O₂)和 HRP 的要求下,AF488-TSA 中的酪胺氨基被钝化,演变成短寿命的任意基。哪一具体步骤中 HRP 催化硫化 H₂O₂ 将酪胺底物钝化为活力任意基,想法快速快且极度局域化。
  2. 自卫权度基共价综合:转成的酪胺自卫权度基更具好强的亲电子器件性,可与靶核蛋白或附过聚集中的幽香族氨基残基(如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸)进行共价键。这款综合不会可逆性的,使荧光团牢固性地粘着在靶分子式附过。
  3. 荧光数据电磁波增进:基于一种 HRP 原子式还可离子液体多条酪胺底物行成独立基,往往在靶血清付进会沉淀积累很多 AF488 荧光原子式,建立数据电磁波扩大。与可直接标上抗体阳性相对于,TSA 模式还可偏态提升低丰度靶标底查重迟钝度,一并恢复地方分辩率。
  4. 服务器局域性:在恣意基生命周期短,不良反应主要的情况在 HRP 随近,颜料的沉淀程度局域化。这 保障了讯号资料不是对外扩散到非靶区域划分,因而可以减少经验噪音分贝。
  5. 荧光优点:AF488 引起光光谱约为 495 nm,使用光光谱约为 519 nm,使用在绿光区,光固相关性强、饱和度高,比较合适与的荧光纺织染料共同来进行多色成相。
AF488-TSA 的技术应用好处源于低丰度靶标地高灵活在线检测。在与一抗或二抗偶联的 HRP 联系,AF488-TSA 在崔化放到靶氧团伙结构附近小区岩浆岩大量荧光氧团伙结构,完成荧光信息的更为明显扩大。原因符号是共价联系,符号后的荧光氧团伙结构在随着的洗滌和激光散斑方式中要保持保持平衡,不要掉落。使用的时要要主要:生理发应制度中应抑制 H₂O₂ 溶液浓度和生理发应时候,以不要非特女性朋友火成岩或组建软组织损伤。生理发应步骤中应阴凉运营,减小荧光淬灭。检测展开后可展开规范封片或显像,换取高信噪比的荧光数字信号。

产品名称:AF488-TSA 

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