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AF633 C5 Maleimide,AF633 C5 马来酰亚胺的反应步骤
发布时间:2025-11-26     作者:axc   分享到:
AF633 C5 Maleimide,AF633 C5 马来酰亚胺的生理反应过程

AF633 C5 马来酰亚胺结构中含有一个马来酰亚胺官能团和一个 C5 碳链连接臂。马来酰亚胺可选择性地与自由巯基(-SH)反应,例如蛋白质或多肽中的半胱氨酸残基。在略偏碱性条件下(通常 pH 6.5–7.5),巯基以硫负离子形式存在,对马来酰亚胺的 α,β-不饱和酮发起亲核攻击,形成稳定的硫醚键,实现染料与靶分子的共价结合。C5 碳链提供了一定的空间灵活性,使染料结合后不易干扰蛋白质构象或活性位点。

典型的的发应步奏有以下:
  1. 盐溶液筹备 :将 AF633 C5 马来酰亚胺产出液析出于非常干燥 DMSO 或 DMF 中,大部分溶度为 1–5 mM,阴凉永久保存。产出液应避免出现油分,防止蛋白质水解出现活力缩减。
  2. 血清质或多肽筹备:待标注的血清或多肽水解在保护液中,保护液应不标巯基打扰物(如 DTT、β-巯基乙酸乙酯等),惯用 PBS、Hepes 或碳酸盐保护液,pH 掌握在 6.5–7.5。血清渗透压通常在 1–10 mg/mL。
  3. 反应迟钝混和:将储备量液稀释溶解至恰当工做渗透压,与淀粉酶液体按摩推油尔比假如,长用摩尔比空间为 1:1 至 5:1(染剂:淀粉酶)。混和后轻柔地搞反或旋轉混匀,防止出现心跳加快振荡器以可以减少淀粉酶转性。
  4. 反馈经济条件:在空调温度或 4℃ 下背光孵育 30–120 分种。反馈期限表明蛋白质巯基础量和反馈生产率修整,提高认识以便充分的标记图片而不神经太过紧绷掩盖。
  5. 撤销反响:反响开始和结束后,可利用下载低质量浓度巯基有机物(如 L-半胱氨酸或谷胱甘肽)或马上采取纯化来撤销未反响的染剂。
  6. 乙酰乙酸纯化:经常用方法步骤包含透析、疑胶过滤水(如 Sephadex G-25)或离心力滤器除去存在有机染料。纯化后可荣获可靠、均一的 AF633 标记符号淀粉酶或多肽。
AF633 C5 马来酰亚胺标示后的球核血清酶在光学仪器上特征为远红荧光,增强光光的波长约 630 nm,发光光的波长约 650–670 nm,远红光区性能抑制了生殖细胞自体荧光干拢,最适合多入口荧光显像。会因为马来酰亚胺对巯基特别抉择性,标示发应不重要干拢球核血清酶的各种技能基团。C5 碳链粗度比较,可抑制荧光染色剂与球核血清酶单单从表面或化学活化位点的单独接触性,因而保持着球核血清酶构象平衡。安全使用应该需要注意下例事情:尽量预防太阳日晒,产出液应高温阴凉存有,的操作中尽量预防含巯基展现剂和高浓盐条件。标注后的产品需承担快适用在研究操作或高温存有,以维护荧光抗弯强度和微生物技术可溶性。AF633 C5 马来酰亚胺可丰富应适用在淀粉酶标注、免疫测量测量、细胞系成相和微生物技术碳原子跟踪等研究操作,为多色荧光成相具备不稳、稳定的远红荧光表现。的产产品分类:AF633 C5 马来酰亚胺含量:95%+相对性状:液态或液态存储环境:-20°C干热遮光保持彩盒型号规格:50mg  100mg  250mg  500mg(按需打造)厂商:pg电子娱乐游戏app 生物体

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