Cyanine 5 Tyramide Conjugates，Cy5荧光染料修饰酚胺的化学特性

Cyanine 5 Tyramide Conjugates 是以 Cyanine 5（Cy5）荧光染料 为核心，结合 酚胺（Tyramide） 功能化的荧光标记衍生物。Cy5 荧光团激发波长约为649 nm，发射波长约为670 nm，具有高亮度、光稳定性强和窄发射光谱的特点。Tyramide 作为酚胺衍生物，能够在过氧化物酶（如 HRP）催化下通过自由基反应共价结合到蛋白质、抗体或组织结构上，实现信号放大标记（Tyramide Signal Amplification, TSA）。Cyanine 5 Tyramide Conjugates 兼具荧光成像和酶催化特异性，广泛应用于免疫组织化学、免疫荧光和单细胞成像等实验。

一、无机化学性状

1. 荧光核心结构
   Cyanine 5 荧光团由二吲哚或苯并吲哚衍生的共轭碳链构成，形成连续 π 共轭体系，保证高量子产率和光稳定性。其窄发射峰使多通道成像实验中干扰最小，适用于复杂生物体系的荧光分析。

2. Tyramide 功能化
   Tyramide 含有酚羟基和胺官能团，可在过氧化物酶存在下被氧化形成酚自由基，攻击酪氨酸残基或其他蛋白质侧链，实现不可逆共价结合。通过 Cy5 与 Tyramide 共价连接形成 Conjugate，既保留荧光信号，又具备酶催化下的靶向结合能力。

3. 结构特点
   Cyanine 5 Tyramide Conjugates 的结构通常由荧光团、链段连接器和 Tyramide 末端组成。连接器提供一定空间灵活性，保证酶催化活性和荧光团信号不受干扰，同时避免对蛋白质或组织结构造成空间阻碍。

二、架构生成慨述Cyanine 5 Tyramide Conjugates 的人工关键有关 荧光团功能键化、Tyramide 淡化和偶联响应，实际方法有以下几点：

1. Cy5 荧光团活化
   Cy5 先进行化学活化，例如通过 NHS 酯或异硫氰酸酯形式生成可反应的活性中间体，为后续与 Tyramide 偶联提供反应位点。活化通常在干燥有机溶剂（如 DMSO 或 DMF）中进行，以防止水解和副反应。

2. Tyramide 衍生物制备
   Tyramide 分子端含酚羟基和胺基，可通过保护基策略（如 Boc 或 Fmoc）保护胺基，避免非特异性偶联。保护后的 Tyramide 可与活化的 Cy5 中间体反应，形成稳定的共价连接。

3. 偶联反应
   Cy5 NHS 酯与保护的 Tyramide 胺基在室温下发生酰胺化反应，形成 Cy5-Tyramide 共价结合产物。连接器长度和化学性质设计合理，保证荧光团和酶底物功能不受干扰。

4. 去保护及纯化
   偶联完成后，通过酸性或碱性条件去除保护基，暴露 Tyramide 的活性酚羟基和胺基。产物通过高效液相色谱（HPLC）或凝胶过滤纯化，以去除未反应染料、残留保护基及副产物，获得高纯度的 Cyanine 5 Tyramide Conjugates。

5. 表征
   纯化后的产物通过质谱（MS）、核磁共振（NMR）以及荧光光谱验证其结构完整性、分子量和光学特性，确保酶催化下可发挥信号放大功能，同时荧光团保持高亮度。

三、APP优越

• 数字数据调小：在 TSA 工作中，Cy5-Tyramide 可在 HRP 有下形成酚轻松自由基，做到靶向疗法淀粉酶质标记符号和数字数据调小。
• 多缓冲区兼容：橙红色荧光可与 DAPI、FITC 等其他荧光有机染料组和，开展多缓冲区成相。
• 面积灵敏性：接连器结构设计要确保酶催化氧化和荧光的信号互不要素，采使用血清质、表面抗原和组织结构标志。

产品名称：Cyanine 5 Tyramide Conjugates 

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