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​Calcein tetraethyl acid,4`,5`-双[N,N-二(羧甲基)氨甲基]荧光素的反应条件
发布时间:2025-11-20     作者:axc   分享到:

Calcein tetraethyl acid,4`,5`-双[N,N-二(羧甲基)氨甲基]荧光素的化学反应情况

4’,5’-双[N,N-二(羧甲基)氨甲基]荧光素,通常称为Calcein tetraethyl acid,是荧光素衍生物的一种,广泛用于细胞活性检测、金属离子示踪及荧光成像研究。其分子结构由荧光素核心与两个N,N-二(羧甲基)氨甲基取代基组成,取代基通过氨甲基桥接连接到荧光素的4’、5’位置。

Calcein tetraethyl acid呈强绿化荧光,增强峰约在495 nm,发射点峰约在515 nm,量子产出率高、光不稳性稳定。氧分子型式中具备有个羧基,使其在水相和缓冲安全体系中层面消融,并具备有稳定的黑色合金金属制铁化合物螯合力量。荧光密度对黑色合金金属制铁化合物氧化还原电位明感,是和中用黑色合金金属制铁化合物判断、催化活性颜料标记图片及膜透亮性实验操作。2. 物理结构特性
  1. 荧光素核心
    荧光素核心提供稳定的共轭体系,使分子具有强荧光发射。共轭平面结构确保荧光量子产率高,适合细胞及分子示踪实验。

  2. N,N-二(羧甲基)氨甲基取代基
    两个N,N-二(羧甲基)氨甲基取代基赋予分子水溶性和离子化能力,同时提供螯合金属离子的位点。羧基的存在使Calcein tetraethyl acid在缓冲液和水溶液中高度分散,不易聚集,同时可与钙、镁等二价金属离子形成稳定配合物。

  3. 功能化特性
    分子末端羧基可与氨基化分子形成酰胺键,便于化学标记和共价结合,使Calcein tetraethyl acid可用于荧光标记、探针合成及载体功能化。

3. 的反应必要条件Calcein tetraethyl acid的制成和功能表化一般而言比如羧基产甲烷、氨基偶联及加载管理体制把控好,具体不良反应能力方式:
  1. 羧基碱化
  • 使用的N-羟基琥铂酰亚胺(NHS)或接近纯化化学药品将羧基转化率为渗透性酯。
  • 发应在有机质石油醚(如DMF或DMSO)中来,以绝对产甲烷利用率和熔化分解性。
  • pH把控好在弱碱性食物的范围(pH 7–8)可改进产甲烷和缩减副发应。
  1. 氨基偶联体现
  • 纯化羧基与氨基化底物(如多肽、血清质或小大分子)在缓存液中表现养成酰胺键。
  • 轻柔环境下实现(空调温度至37℃),发应精力一般说来为1–12时间,以保护发应已经且预防荧光素设计分解。
  1. 储存系统选
  • 不起作用多在PBS(聚磷酸盐加载区液)或HEPES加载区液中做,pH提升在7.2–8.0。
  • 加载网络体系需不要高氧化反应还原电位铝合金正离子或强氧化反应剂,尽可能的防止发动机组升温串扰羧基碱化或荧光预警。
  1. 纯化与动态平衡性
  • 化学表现完工后凭借高质量高效液相色谱(HPLC)、抑菌凝胶渗入或透析纯化产品,清理未化学表现采血管和副产品。
  • 有机物在底温、闭光生活条件下儲存,可持续荧光能力和化学上的增强性。

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