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AF405 二苯并环辛炔,AF405 DBCO的合成步骤概述
发布时间:2025-11-11     作者:axc   分享到:
AF405 二苯并环辛炔,AF405 DBCO的人工布骤介绍

AF405二苯并环辛炔(AF405 DBCO)是一种功能性荧光标记试剂,由Alexa Fluor 405荧光核心和二苯并环辛炔(DBCO, Dibenzocyclooctyne)官能团组成。Alexa Fluor 405是一种蓝色荧光染料,激发峰约为402纳米,发射峰约为421纳米,具有高量子产率、光稳定性良好和荧光强度高的特点。DBCO官能团是一种应答点击化学(copper-free click chemistry)的环炔结构,能够与叠氮基团(azide)高选择性地发生环加成反应,实现生物大分子的温和共价偶联。AF405 DBCO因其高选择性、温和反应条件和强荧光信号,在生物分子标记、荧光探针构建、细胞成像及药物递送系统研究中具有广泛应用。

镶嵌步聚详述AF405 DBCO的自动生成一般说来是指荧光团自动生成、官能团接触或是纯化表现4个关键阶段中。下述为自动生成发展历程:
  1. 荧光核心的制备
    首先合成Alexa Fluor 405核心分子。荧光团核心通常由多环芳香结构组成,通过适当的取代基修饰来增强量子产率、水溶性和光稳定性。在核心合成过程中,需控制反应条件如温度、溶剂和反应时间,以确保分子结构完整,并保留用于进一步偶联的功能基团(如羧基或氨基)。

  2. 官能团引入——DBCO连接
    荧光团合成后,通过活化羧基或氨基的方法,将DBCO官能团连接至荧光核心。常用的策略包括使用活化酯(如NHS酯)或其他可逆保护基团,以保证DBCO的环炔结构不被破坏。反应通常在极性有机溶剂(如DMSO或DMF)中进行,并在温和条件下完成,以避免荧光团降解或DBCO环炔开环。

  3. 偶联反应控制
    在DBCO连接过程中,需要控制摩尔比和反应时间,以获得单一连接产物并避免多点偶联。通过适当选择溶剂体系和缓冲条件,可以提高反应效率,并减少副产物生成。温和反应条件不仅保护荧光团光学性能,也保证DBCO的反应活性和结构稳定性。

  4. 保护基去除(如有)
    如果在DBCO或荧光团连接过程中使用了保护基(例如氨基或羧基保护基),需在反应完成后进行去保护处理。去保护步骤通常在温和酸性或碱性条件下进行,以避免荧光团降解和DBCO环炔开环,确保最终产物功能完整。

  5. 纯化步骤
    合成完成后,需要去除未反应的起始物、副产物及溶剂残留。常用的纯化方法包括:

  • 快速液质色谱(HPLC)反相C18柱区分,利用均值过柱构建对方货物与沉渣的区分。
  • 硅胶柱层析,用于实验室规模初步纯化,结合荧光检测快速识别目标产物。
    纯化后的AF405 DBCO通常为干粉形式储存,避免水分和光照对荧光团和环炔结构的破坏。

  1. 表征与质量验证
    最终产物需进行结构和光学性能表征,包括:

  • 核磁共鸣(NMR)确定碳原子组成和官能团连接方式情况下;
  • 质谱(MS)判断原子核式量和原子核式式;
  • 紫外线-可以说光谱仪分析(UV-Vis)和荧光光谱仪分析核实荧光安全性能及溶解发射卫星光的波长;
  • 薄层色谱(TLC)最快开展饱和度。
  1. 应用准备
    纯化和表征完成的AF405 DBCO可用于后续生物偶联实验,例如与叠氮化物修饰的蛋白质、核酸或纳米载体进行温和点击化学反应,实现高选择性、可控的荧光标记。由于DBCO点击化学为无铜条件下的反应,适合活细胞或敏感生物体系使用。

产品名称:AF405二苯并环辛炔

含量:95%+相对性状:粉末状或液态体储存状态:-20°C干热背光维持标签印刷尺寸:50mg  100mg  250mg  500mg(按需供给)制造厂:pg电子娱乐游戏app 微生物

AF405二苯并环辛炔

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