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AF488 NHS Ester,CAS号:1374019-99-4的光学性质
发布时间:2025-11-11     作者:axc   分享到:

AF488 NHS Ester,CAS号:1374019-99-4的磁学性

AF488 NHS Ester(CAS号1374019-99-4)是一种功能性荧光标记试剂,由Alexa Fluor 488荧光核心和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯组成。Alexa Fluor 488属于绿色荧光染料,激发峰约为495纳米,发射峰约为519纳米,具有高量子产率、良好光稳定性以及低光漂白特性。NHS酯末端为分子提供高度选择性的化学活性,可与伯胺(–NH₂)官能团发生共价偶联,生成稳定酰胺键。这使AF488 NHS Ester广泛应用于蛋白质、多肽、抗体及其他含氨基生物分子的标记、荧光探针构建和分子成像研究。

电化学生理反应的工作原理AF488 NHS Ester的现象不可逆性重点是NHS酯与伯胺的亲核增加-改变现象。这个现象具备高使用性、温润水平和闭环性,使其在生物体学和生物体实验室中的表现出宽泛可接受性性。具体实施现象方式可划分为下多少个步:
  1. NHS酯活性及亲核攻击
    NHS酯是一种羧酸活化衍生物,其酰基碳原子带有部分正电荷,易受到亲核试剂攻击。伯胺分子中的氮原子孤对电子作为亲核试剂,能够进攻NHS酯的羰基碳。这个步骤形成一个四面体中间体,是整个反应的速控步骤。反应速率受溶液pH、温度以及底物浓度影响。通常在中性或弱碱性缓冲液(pH 7.0–8.5)中进行,可保证伯胺的亲核性最大化,同时避免NHS酯的水解。

  2. 四面体中间体形成
    在伯胺进攻酰基碳原子后,形成一个四面体过渡状态。此中间体包含原NHS酯碳、伯胺氮原子和NHS离去基。四面体结构的稳定性受到溶剂极性和缓冲液环境的影响,通常在水相或缓冲液中迅速重排以释放NHS离去基。

  3. 离去基脱离与酰胺键生成
    四面体中间体通过NHS离去基脱离形成稳定酰胺键。NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)离去能力强,使反应在室温下即可高效完成。酰胺键的形成是共价反应的最终产物,荧光团与蛋白质、多肽或抗体牢固连接,标记稳定,不易在生物体系中脱落。

  4. 发生反应经济条件对速率的影向
  • pH值:碱性食物至弱碱性食物情况最適合响应。低pH会减弱伯胺亲核性,高pH也许变快蛋白质水解。
  • 可挥发高沸点溶剂:反响可在水相或含小量正负极可挥发可挥发高沸点溶剂(如DMSO、DMF)安全体系中做,以融化底物或调控反响性。
  • 温:环境温度或常温(4–25℃)做反應,能助做到荧光团和菌物分子式的稳固性。
  • 摩尔比:NHS酯略大量便用以保证标签宽裕;对太敏感球膳食纤维,稳定制摩尔比以减轻多方偶联导至能力流失。
  1. 副反应控制
    NHS酯在水相中会被水水解生成羧酸,因此反应需迅速且避光操作,以防荧光团降解或标记效率下降。通过优化pH、温度和摩尔比,可减少副反应,提高目标分子特异性标记效率。

  2. 光学性质与反应优势
    AF488 NHS Ester的荧光团具有高亮度和光稳定性,在反应过程中不易漂白。反应完成后,荧光团与生物分子形成稳定结合,可用于长期成像和多通道实验。其发射波长位于绿色光区,便于与其他荧光染料组合,实现多组分追踪和FRET实验。

产品名称:AF488 NHS Ester

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AF488 NHS Ester

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