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PSS-FITC,聚(4-苯乙烯磺酸钠)-异硫氰酸荧光素的纯化过程
发布时间:2025-10-11     作者:axc   分享到:
PSS-FITC,聚(4-苯乙稀磺酸钠)-异硫氰酸荧光素的纯化的时候

PSS-FITC 是一种将水溶性阴离子高分子聚(4-苯乙烯磺酸钠,PSS)与荧光染料异硫氰酸荧光素(FITC)共价偶联形成的功能化高分子。PSS 分子链上每个重复单元都带有磺酸钠侧链(–SO₃⁻Na⁺),赋予高分子良好的水溶性和阴离子特性,使其在水相中表现出稳定分散性,并可通过静电相互作用与阳离子材料或界面结合。

FITC 是种较为常用的中股票波段荧光颜料,激活光波光波波长约 495 nm,发送光波光波波长约 515 nm。其末的异硫氰酸基(–N=C=S)也可以与胺基造成亲核增益不起作用,造成平衡的氨基甲基硫代酯键(thiocarbamate),保证 得碳原子荧光标出。PSS-FITC 切合了得碳原子的水可溶性和阴亚铁离子基本特征并且 颜料的可检验荧光讯号,可以于碳原子示踪、材质表面上表达及混合机制调查。二、结合方法说明
  1. 高分子溶液准备
    将 PSS 溶解于碳酸盐缓冲液或磷酸盐缓冲液(pH 8–9)中,确保高分子链上的偶联位点(通常为少量引入的胺功能化单体或链末端胺基)充分解离,以提高反应活性。

  2. FITC 溶液准备
    将 FITC 溶解于极性有机溶剂(如 DMSO 或 DMF)中,使其均匀溶解。溶液体积应适合缓慢加入高分子体系,避免局部浓度过高导致副反应。

  3. 偶联反应
    将 FITC 溶液缓慢滴加到 PSS 溶液中,在室温条件下轻柔搅拌。反应过程中,FITC 的异硫氰酸基与 PSS 链上的胺基发生亲核加成,形成稳定的氨基甲基硫代酯共价键。反应时间通常为 4–12 小时,可根据偶联效率调整。温和的反应条件可确保高分子链和染料的结构稳定。

  4. 反应终止
    偶联完成后,可通过调节 pH 或加入缓冲液终止反应,防止过度偶联或副反应。此时产物呈均匀水溶液状态,荧光信号稳定。

三、纯化过程中
  1. 透析
    使用适当分子量截断的透析膜去除未反应的 FITC 分子和低分子杂质。透析通常在水相中进行,持续数小时至过夜,期间更换清水多次,以确保纯化彻底。

  2. 凝胶过滤
    对高分子体系进一步分离,通过分子筛柱分离未偶联的染料分子与聚合物,保证最终产物的分子均一性。

  3. 超滤与浓缩
    对透析或凝胶过滤后的产物可采用超滤方法进行浓缩,同时去除残余小分子,得到水溶性均一的 PSS-FITC 高分子溶液。

产品名称:PSS-FITC 

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