Cy5-UDCA,花菁染料CY5标记熊去氧胆酸的表征方法
Cy5-UDCA,花菁纺织染料CY5标出熊去氧胆酸的表现形式熊去氧胆酸(Ursodeoxycholic acid, UDCA)是种次级胆汁酸,分子结构式骨架为甾体类四环格局,C-24 端含羧基,C-3 与 C-7 位留存羟基,具备着亲水与疏水男女性特性。要达到其荧光大数据可视化及分子结构式定位跟踪,常使用花菁有机染料 Cy5 与 UDCA 通过共价偶联,获得 Cy5-UDCA。其备制的办法主要可分为如下两个方法步骤:成分安排与滋养UDCA 分子式上的 C-24 羧基是核心的遮盖位点。前提是将 UDCA 不能溶解无水二甲基甲酰胺(DMF)或二甲基亚砜(DMSO),假如合适量碳二亚胺(EDC)与 N-羟基蜜腊酰亚胺(NHS),使羧基碱化转为 NHS 酯。这些整个过程常在常温或偏低环境温度(15–25 ℃)下实现,以不要副体现制造。Cy5 纺织染料建立用 Cy5-NH2 或 Cy5-amine 对于标出基团。犹豫 Cy5 其实质就具亲丙烯酸乳液(带磺酸基),在水相/生物碳相交织机制中仍具好的水解性。将 Cy5-NH2 水解在 DMSO 中,慢慢的加入适量至 UDCA-NHS 酯的的反响机制。依据羧基与氨基的缩合的反响,建立稳定性的酰胺键,将 Cy5 共价偶联到 UDCA 分子结构上。发应要求常在恒温至 30 ℃ 范围图内混和 12–24 小时英文,保护质量不起作用非常。要为以防光漂白剂或光降解,不起作用过程中 应在阴凉水平下完成。减慢工作体系常决定 pH 7.4 的 PBS 或碳酸盐减慢液,以保护质量氨基占据适当的不起作用的情形。纯化步数表现截止后,粗生成物中也许带有未表现的 Cy5 染剂、自由 UDCA 及副生成物。使用形式为:透析法(原子式量挤占膜 1–3 kDa),清除小原子式未反應物;高效率的色谱仪色谱(HPLC),只能根据疏水溶性异同隔离学习目标终产物;冻干整理,提升 Cy5-UDCA 颗粒。化合物定性分析Cy5-UDCA 的组成部分可进行多种多样技木核实:UV-Vis 融合光谱分析:在 640 nm 左右有 Cy5 基本特征峰;荧光光谱分析:火箭发射峰在 660–670 nm;质谱(MALDI-TOF 或 ESI-MS):分子结构量较 UDCA 多约 700–800 Da;NMR:提示 C-24 羧基变为为酰胺的电化学位移发生改变。存贮情况Cy5-UDCA 需背光保护,环境温度(−20 ℃)冻干粉状的程序佳,悬浊液的程序下可短期的存贮在 4 ℃。尽量不要对此冻融,以控制其光学元件生物和组成固界定。由此可见,Cy5-UDCA 的化学合成做法管理处内在 C-24 羧基的滋养与 Cy5-NH2 的酰胺化发应迟钝。该做法操作的简易、发应迟钝条件温顺,到的偶联化合物具有 UDCA 的疏水骨架与 Cy5 的近红外荧光特点,可以后期在治疗药物递送、胆汁酸消化吸收跟踪及膜能够 效用探究中的利用。新产名号称:Cy5-UDCA,花菁染剂CY5标示熊去氧胆酸的色度:95%+遗传性状:无水硫酸铜或流体存贮水平:-20°C吹干闭光另存包装袋规格为:50mg 100mg 250mg 500mg(按需给出)服务商:pg电子娱乐游戏app
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