CY5.5-choline，花菁染色剂CY5.5符号胆碱的获得具体步骤

Cy5.5-Choline 是由胆碱（Choline, HO–CH2–CH2–N+(CH3)3）与近红外染料Cy5.5偶联而成的荧光探针。胆碱是一种小分子季铵盐，存在于生物体系中，分子含有一个羟基和带正电的三甲胺基团，具有亲水性和生物活性。通过与Cy5.5偶联，能够实现对胆碱相关分子过程的荧光可视化。

碳原子设计方案胆碱结构的小，带正电荷量，随时偶联到Cy5.5促进企业可以改善活性酶染料的水可溶。偶连接常按照胆碱的羟基与Cy5.5-NHS ester或Cy5.5-异硫氰酸酯等活性酶基团响应自动生成碳酸酯或氨基甲酸酯键。同一种具体方法是先将胆碱与蜜腊酸酐响应，转化羧基后与Cy5.5-NHS偶联。提炼操作步骤胆碱活性体现将胆碱不溶无水吡啶或DMF中，进入蜜腊酸酐，在室内温度至40 ℃下体现，自动生成胆碱-蜜腊酸酯。该步数使胆碱氧分子添加羧基，有助与染剂偶联。粗结果经萃取法与柱层析分割，得以带羧基的胆碱研究物。性格开朗酯备制胆碱-虎珀酸酯在DMF里添加入EDC·HCl与NHS，转化胆碱-NHS ester两边体。该两边体需要无水、惰性气体下高效运行，严防止溶解。与CY5.5偶联将CY5.5-amine或CY5.5-NH2易溶于DMF，比较慢倒入胆碱-NHS ester溶剂，在含碱能力（DIPEA存在着下）下搅拌器不良反应12–24H。借助酰胺键或碳酸酯键完成共价结合起来，到Cy5.5-choline。纯化历程作用搭配物经旋蒸去有机溶剂后，残余的物易溶于甲醇/水饱和溶液，通过除盐正确处理。终结果用提纯型HPLC纯化，C18柱安全体系下为水/乙腈系数洗刷。CY5.5的近红外获取（675 nm）可用为测试移动信号，汇集纯产品酚类化合物，冻干能够 深橙红色粉化。定性分析UV-Vis：显视经典CY5.5释放峰（~675 nm）。荧光光谱分析：调动起在675 nm，发射成功在695–710 nm，与Cy5.5不对。质谱：团伙铝离子峰要确认偶联货物团伙量。NMR：明显可见的胆碱三级甲等医院胺的手机信号与Cy5.5芬芳的手机信号，羟栽培基质子消除，表明偶联获得成功。HPLC：单峰揭示含量>95%。归纳总结Cy5.5-Choline 的提炼以胆碱的羟基为表达位点，进行虎珀酸性反应运用相连接臂，再与Cy5.5偶联。该电极紧密结合了胆碱的生物学功能和CY5.5的光学玻璃能力，纯化根据于HPLC，表现可由光谱分析学与质谱验证。因此终产物在引入荧光图标胆碱具象化物学与探究胆碱分解探究中有更重要意义所在。

产品名称：CY5.5-choline，花菁纺织染料CY5.5标注胆碱

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