DSPE-CY7,CY7标记二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺的反应步骤
DSPE-CY7,CY7标签二硬脂酰基磷脂酰甲醇胺的影响过程
DSPE–CY7 是通过将二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE)与近红外荧光染料 CY7 共价偶联形成的两亲性荧光脂质分子。DSPE 提供双 C18 饱和脂肪酸链和磷酸乙醇胺头基,可稳定嵌入脂质双层,并为 CY7 提供偶联位点。CY7 荧光团的激发波长约 743 nm,发射波长约 767–780 nm,量子产率高、光稳定性强,适用于深组织成像及脂质体或纳米载体示踪。
DSPE–CY7 的分离纯化表现流程重点主要包括一下四个环节:1. 纯化荧光活性染料CY7 荧光团一样 以羧基或异硫氰酸酯衍生物物类型发生。若为羧基,则需前提是确认 N-羟基蜜腊酰亚胺(NHS)产甲烷,出现 CY7–NHS ester,以的提升羧基的亲电性,使其就可以与 DSPE 的伯胺更高效偶联。产甲烷环节一般 在无水生物碳化学相转移催化剂(如 DMSO 或 DMF)中参与,并倒入生物碳化学碱(如 DIPEA)以形成酸性生活环境,利于出现产甲烷酯。2. 偶联生理反应将纯化后的 CY7–NHS ester 与 DSPE 的伯胺头基在有机物液体中相溶。的不良的的反应中,DSPE 的伯胺作亲核微生物培养基普通攻击 CY7–NHS ester 的羰基碳,转变成不稳的酰胺键,也移除 N-羟基虎珀酰亚胺(NHS)副物质。的不良的的反应标准清新,平常在在常温或略高温度下确定 12–24 时间,以抓好压根偶联。的不良的的反应中可进行把握 DSPE 与 CY7–NHS 的摩尔比调理物质产出率,不要荧光团量过大或农药残留未的不良的的反应物。3. 不起作用撤消与纯化偶联想法来完成后,经由放置、透析或矽胶柱/反相效率色谱仪色谱(HPLC)除去未想法的 CY7 及副终结果。纯化后的 DSPE–CY7 终结果一般来说呈橙红或深颜色粉末状,含有表现形式性的近红外消化峰和卫星发射峰,可经由 UV–Vis 光谱仪仪和荧光光谱仪仪认证构成与光纤激光切割机的性能参数。质谱分折进一个步骤查证原子核量及共价偶联的胜利。4. 性验证通过与保存纯化后的 DSPE–CY7 具备比较好的溶水性,可不溶生产高沸点溶剂如氯仿、甲醇及大量 DMSO。其光稳固高朝,可以免 光漂白剂,适于长期性店铺于遮光、温度过低环境下(经常–20°C)。在脂质体或纳米级媒体中,DSPE–CY7 能稳固置入膜层,荧光团隶属于膜外表亲水头基区,便宜显像和降钙素原检测分折。依据综上所述流程,DSPE–CY7 将 DSPE 的膜锚定效率与 CY7 的近红外荧光能力完美无瑕综合,实现了了高质量、动态平衡的能力化脂质碳原子。其制法时候症状要求温柔、挑选高,终产物动态平衡且可在脂质体、納米顆粒及膜对模型采集体系影响期恢复光学元件能,糊口物影像、膜示踪及药剂递送研究探讨产品名称:DSPE-CY7,CY7标注二硬脂酰基磷脂酰乙酸乙酯胺
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