CY7-Fetoprotein，CY7甲胎蛋白的反应条件控制方法
CY7-Fetoprotein，CY7甲胎蛋清的现象的条件操作技术
CY7-甲胎蛋白（CY7-Fetoprotein, CY7-AFP）是通过将近红外荧光染料Cyanine7（CY7）与甲胎蛋白（Alpha-fetoprotein, AFP）偶联得到的一类荧光标记蛋白复合物。AFP是一种分子量约70 kDa 的糖蛋白，含有多个赖氨酸残基的ε-氨基和较少的半胱氨酸巯基，这些功能基团为其提供了与荧光染料衍生物反应的位点。CY7作为典型的近红外荧光染料，具有长波长激发与发射、高组织穿透力和低背景信号等优势，偶联后得到的CY7-AFP可用于体内外成像、蛋白定位研究以及高灵敏度检测实验。
在融合CY7-AFP的时候中，关键所在部骤是将吸附性化的CY7双重性物与AFP的氨基或巯基發生特异的不良反应。经常使用的染剂行式为CY7-NHS酯或CY7-马来酰亚胺（CY7-Maleimide），对应与赖氨酸氨基和半胱氨酸巯基的不良反应。按照发生反应工作步骤正确：蛋清储存液筹备AFP需析出在适和的缓解区采集体系中。若操作NHS酯标注，普通抉择无胺的缓解区液，如0.1 M碳酸盐缓解区液（pH 8.3）；若操作马来酰亚胺标注，则适当pH 6.5–7.2 的磷酸缓解区液，以要保持巯基活力性。避免出现操作含Tris或甘氨酸的缓解区液，会因为其氨基会与NHS酯行业反應。蛋白质预工作在巯基标志解决方案中，若AFP巯基正处于二硫键环境，可以先用温柔的恢复备份剂（如TCEP）外理，裸漏恣意巯基，妥善与CY7-Maleimide形成生理反應。恢复备份剂应在生理反應前删去，为了防止与有机染料争夺。催化活性有机染料饱和溶液开始准备CY7-NHS酯或CY7-Maleimide一般说来以DMSO或DMF为液体消融，密度为1–10 mM。在颜料团伙易光氯漂，所有操作使用应阴凉去。偶联作用将CY7延伸物接摩尔比（经常是5–20倍于AFP的摩尔量）引入到蛋清盐溶液中，在遮光因素下轻柔的混合着。NHS酯与蛋清赖氨酸氨基的不起作用不可逆性是：氨基的孤对电子元器件攻占NHS酯的羰基碳，养成它四面体之间体，宣泄NHS离去基团，终添加增强的酰胺键。马来酰亚胺与巯基的不起作用不可逆性为Michael暴伤，巯基看做亲核体进攻马来酰亚胺双键，添加增强的硫醚键。表现必备条件操作NHS酯表现迟钝事件大多数为0.5–2 h，环境温度为空调温度；马来酰亚胺表现迟钝通常在较短事件内成功（30–60 min）。于此全过程中需解决高一个温和强光直接，以提高核蛋白催化活性和活性染料稳固性。纯化步奏反馈到位后，混合型物中既包函标注化合物，也具有刺激性未反馈的游离子于染剂。较常用的纯化手段为凝露净化层析（如Sephadex G-25）或反渗透膜抽滤。纯化的时候中，切合了染剂的AFP因分子式量极大而与游离子于染剂拆分，故而受到高纯净度的CY7-AFP。表现研究分析记号货物需实现分光光度计-可以看出光谱分析仪和荧光光谱分析仪去探测。CY7的释放峰约为750 nm，AFP的蛋清释放峰在280 nm，两者之间的指数值能作于运算记号有效率。寻常对象记符号号度为2–几个纺织染料分子结构/蛋清，以保证质量荧光信号灯密度而不损害蛋清的功能。汇总了：CY7-甲胎淀粉酶的准备依赖关系于NHS酯或马来酰亚胺产甲烷颜料与AFP上氨基或巯基的共价偶联，全部表现流程属于加载液选取、淀粉酶预清理、颜料融解、偶联表现、纯化与定性分析5个主要流程。根据这样流程达到的CY7-AFP并不是保持着了AFP的淀粉酶特征，同时有稳定的的近红外荧光特征，为其在体內成相、团伙示踪与高迅敏度在线检测出具了稳定可靠的方法。产品名称：CY7-Fetoprotein，CY7甲胎球蛋白
含量：95%+物理性质：固态垃圾或液滴贮存前提：-20°C皮肤干燥背光包存纸盒包装技术参数：50mg 100mg 250mg 500mg（按需供给）工厂：pg电子娱乐游戏app 怪物
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