CY5-Dextrhai，CY5图标葡聚糖的不良反应流程

Cy5标记的葡聚糖（Cy5-Dextran）是一类典型的荧光多糖探针，其制备过程依赖于将含有活性基团的Cy5染料与葡聚糖分子链上的羟基或改性位点发生偶联反应。整个反应步骤主要包括：载体多糖的预修饰、染料活化与耦合反应、纯化及表征等几个关键环节。

首要是葡聚糖的预操作环节之一。具备着葡聚碳水子具备着丰富伯羟基和次羟基，但其发应渗透性相对性不强，为此一般来说想要可以通过化学上技术引出渗透性基团，比如说在酸碱度前提条件下与氯乙酸发应生产羧甲基葡聚糖（CM-dextran），或所采用氰基溴化物（CNBr）滋养葡聚糖骨架以引出氨基位点。这个改良环节之一为下一步的染色剂接枝供应了亲核发应位点。二、是Cy5活性活性染料的活性过程中。可用的Cy5-NHS ester或Cy5-COOH在化学上获得中兼有强些的反應性，这里面Cy5-NHS ester可与氨基时有发生高质量的酰胺化反應，而Cy5-COOH则需只依靠EDC/NHS管理模式活性后方能与羟基或氨基搭配。反應大多数在pH 7.5–8.5的响应管理模式中做，以要确保氨基的亲核性，同一时间防止出现Cy5活性活性染料的生物降解。3步是偶联不起作用的开展。将淡化过的葡聚糖析出于PBS或碳酸盐储存液中，相对比较缓慢下载Cy5-NHS ester水溶液，在和缓攪拌下不起作用2–12几小时。不起作用的摩尔比需严厉控制，往往葡聚糖上的可不起作用位点与Cy5摩尔比保护在1:5至1:20内，以确定既能达到足够的荧光讯号，又不要过于记号影响析出性越来越低或的空间构象毁坏。顺利完成化学表现后，必须 做好纯化过程以去掉未化学表现的溶合Cy5。最常用的纯化方式 是指透析（MWCO 3–10 kDa）、凝胶的作用油烟净化器层析（如Sephadex G-25）或超滤膜系统。这类方式 要合理溶合大原子记号有机物与小原子硫氰酸盐。纯化后有机物一般而言呈深紫橙红色或蓝粉色荧光特征英文，可在650 nm激发起、670 nm放出激发光谱下判断。后是定量具体分析与检验。凭借分光光度计-常见消化光谱具体分析具体分析具体分析和荧光光谱具体分析具体分析具体分析测试标识图片取得胜利与失败；凭借磁共振检查现象（NMR）或傅里叶红外光谱具体分析具体分析具体分析（FTIR）狠抓葡聚糖骨架未被破裂；凭借动图光散射（DLS）与抑菌凝胶渗色谱（GPC）具体分析其氧分子量布置和聚在一起手段。标识图片度（Degree of Labeling, DOL）常凭借吸光度比率运算，通常情况下保持在每100个葡聚糖单元式含1–3个Cy5氧分子为宜，以狠抓信号灯抗弯强度与水解性中间的动平衡机。总而言之，Cy5-Dextran的制得方法按照“葡聚糖产甲烷—Cy5偶联—纯化—分析方法”的流程图构建，既长期保持了葡聚糖的亲水与生物体相溶性，又传入了维持的远红荧光因素，为其在生殖细胞示踪、微血管成相和药物剂量递送模式中的用途确立了条件。

产品名称：CY5-Dextrhai，CY5标上葡聚糖

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