AF488 TCO 是 Alexa Fluor 488 系列的一个特化衍生物，连接了 Trans-Cyclooctene (TCO) 活性基团。TCO 属于一种高反应速率的“点击化学”基团，可与含有 tetrazine 的分子发生快速且高度特异的生物正交反应（Inverse Electron-Demand Diels–Alder, IEDDA）。AF488 TCO 结合了 Alexa Fluor 488 的优异荧光性能与 TCO 的高反应性，使其成为现代生物正交标记的理想选择，尤其适合细胞和体内标记。

化学特性
AF488 TCO 具有典型的 Alexa Fluor 488 荧光特性：激发波长约 495 nm，发射波长约 519 nm。其结构上通过稳定的共价键将 TCO 链接至荧光团。TCO 具备高度应变能，使其与 tetrazine 的反应非常迅速（反应速率可达 10^3–10^6 M^-1·s^-1），在生物条件下无需催化剂即可完成标记。

标记原理
AF488 TCO 的标记依赖于与 tetrazine 的 IEDDA 反应：

TCO 与 tetrazine 中遇会发生 [4+2] 环加上不良反应；转化维持的共价乙酰乙酸，基本上不转化副乙酰乙酸；反应迟钝传输速度超快，可在活内部或身体条件下实行实时标注。

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