DPPE-PEG5000,二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇5000的合成方法
产品名称:DPPE-PEG5000,二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇5000的合成方法
合成方法
1 重点反映进行
步数1:DPPE的活性表现业务类型:DPPE的羧基或氨基需进行化学物质绘制运用表现位点(如羧基纯化或氨基保护好)。例子1:DPPE-COOH的纯化:免疫试剂:EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺)和NHS(N-羟基虎珀酰亚胺)。必备条件:无水DMF(N,N-二甲基甲酰胺),pH 5.0-6.0,环境温度反映2-4钟头,转换产甲烷酯(DPPE-NHS)。范例2:DPPE-NH₂的保护措施(若要):化学药品:Fmoc-OSu(9-芴甲氧羰基虎珀酰亚胺)或Boc-ON(叔丁氧羰基-ON)。先决条件:二氯二氧化氮(DCM)或DMF,pH 8.0-9.0,转化成保障基装饰的DPPE(如DPPE-Fmoc)。工作步骤2:PEG5000的偶联反响的类型:纯化后的DPPE与PEG5000的未端基团(如氨基或羧基)在酰胺键或酯键相连接。实例1:DPPE-NHS + PEG5000-NH₂ → DPPE-PEG5000-NH₂(酰胺键)。條件:无水DMF,pH 7.0-8.0,制冷不起作用12-24小,摩尔比DPPE-NHS:PEG5000-NH₂ = 1:1.2。举例2:DPPE-COOH + PEG5000-OH → DPPE-PEG5000-OH(酯键)。免疫试剂:DCC(二环己基碳二亚胺)和DMAP(4-二甲氨基吡啶)。先决条件:无水DCM,室内温度作用24-24小时候,生成二维码酯键连结的结果。
2 纯化与研究方法
纯化的办法:透析:挪用分子式量3500-5000 Da的透析袋,取除未反馈免疫试剂和副货物(如EDC/NHS或DCC/DMAP)。疑胶过滤程序色谱:Sephadex G-25或Superdex 200,提取阶段目标货物与小原子核杂物。HPLC:反相C18柱,甲醇/水(含0.1% TFA)为流入相,纯化产品并校正纯净度(>95%)。分析的方式的方式:格局根本:¹H NMR:DPPE的亚甲基本材料子(δ≈1.2-1.5 ppm)、PEG的去重复单位(δ≈3.5-3.8 ppm)及磷脂颈部质子(δ≈3.0-4.5 ppm)。MALDI-TOF:分析氧团伙量,核对DPPE与PEG5000的接入(系统理论氧团伙量:DPPE≈680 Da + PEG5000≈5000 Da → 总氧团伙量≈5680 Da)。模块核验:技术性光散射(DLS):判断脂质体表达后孔径(如100-200 nm)。Zeta电位差:监测单单从表面正电荷(羧基去质子化后带负电,约-20 to -30 mV)。血细胞循坏實驗:确认小鼠尾静脉皮下注射皮下注射,检验血浆中DPPE-PEG5000突显的奈米粒含量随着间变化无常,校验半衰期变长郊果。贴心表明:仅使用科研工作,没法使用身休测试!wyh


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