DPPE-PEG-Ce6,二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-Ce6的合成方法
新产商品编码称:DPPE-PEG-Ce6,二棕榈酰基磷脂酰乙酸乙酯胺-聚乙二醇-Ce6的组成的方法
合成方法
1 关键点响应步骤之一
关键步骤1:DPPE-PEG的分解体现性质:DPPE的无水乙醇胺个部分与PEG的羧基或氨基完成酰胺键或酯键连到。范本1:DPPE-NH₂ + PEG-COOH → DPPE-PEG-COOH(EDC/NHS纯化羧基,添加酰胺键)。例子2:DPPE-COOH + PEG-NH₂ → DPPE-PEG-NH₂(酰胺键),事件经过羧基化绘制添加反响位点。标准:稀释剂:无水有机化学稀释剂(如DMF、DMSO或氯仿),不要磷脂水解反应。的温度:40-60℃,想法时刻12-24每小时。催化不良反应的作用剂:EDC(产甲烷羧基)和NHS(可靠里面体),提升 不良反应生产率。方法步骤2:BCN的偶联不起作用多种类型:BCN的羧基或氨基与DPPE-PEG的末梢基团(如氨基或羧基)经由生物键接触。实例1:DPPE-PEG-NH₂ + BCN-COOH → DPPE-PEG-BCN(EDC/NHS碱化BCN的羧基,导出酰胺键)。举例2:DPPE-PEG-COOH + BCN-NH₂ → DPPE-PEG-BCN(酰胺键)。要求:pH:7.0-7.5(防止羧产品子化或氨基去质子化)。常温:常温或37℃,不良反应時间2-4个钟头。摩尔比:DPPE-PEG:BCN = 1:1.2(优化提升反馈利用率)。
2 纯化与定量分析
纯化的办法:透析:挪用分子结构量基于PEG链长确定(如10k Da),剔除未响应微生物培养基和副化合物。凝露进行过滤色谱:Sephadex G-25或Superdex 200,破乳目的乙酰乙酸与小团伙溶物。HPLC:反相C18柱,甲醇/水(含0.1% TFA)为变化相,纯化物品并检测法色度(>95%)。定量分析形式:结构类型认可:¹H NMR:DPPE的亚甲基本材料子(δ≈1.2-1.5 ppm)、PEG的重新象限(δ≈3.5-3.8 ppm)和BCN的环丙烷质子(δ≈0.5-1.0 ppm)及环辛炔质子(δ≈2.0-3.0 ppm)。MALDI-TOF:检验碳原子量,查证DPPE、PEG和BCN的联接。工作印证:弹窗生物学反映的高效率:与叠氮化物(如DBCO-PEG-FITC)反映后,在荧光光谱图或HPLC加测乙酰乙酸产生量(反映的高效率一般来说>90%)。技术性光散射(DLS):测定法纳米技术顆粒粒级(如脂质体表达后粒级约100-200 nm)。Zeta电势差:测评外面正电荷(羧基去质子化后带负电,约-20 to -30 mV)。和睦提示语:仅使用在科技,没有使用在人的身体测试!wyh


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