TQ4WS-Alkyne（Tide Quencher 4WS-Alkyne）是一种功能化水溶性暗色荧光猝灭剂，结合了宽光谱猝灭特性与末端炔基（–C≡CH）官能团，广泛应用于分子生物学、荧光探针设计、核酸与蛋白质标记以及生物材料功能化研究。TQ4WS-Alkyne 属于 Tide Quencher 系列的第四代水溶性猝灭剂，其设计旨在提供高效荧光猝灭能力，同时通过末端炔基实现可控共价偶联，适用于点击化学（Click Chemistry）反应，尤其是铜催化的叠氮–炔环加成反应（CuAAC），从而在生物体系中实现精确、高效率的探针构建。

分子结构与化学特性
TQ4WS-Alkyne 由水溶性猝灭核心和末端炔基官能团组成。猝灭核心具有宽吸收光谱，可有效吸收从蓝色到红色的多种荧光信号，但自身几乎不发射荧光，因此在构建 FRET 探针或荧光开关分子时可以显著降低背景信号。末端炔基提供了高度特异的点击化学反应位点，可与叠氮（–N₃）官能团的分子在温和条件下高效共价偶联，无需额外保护或复杂反应条件，保证生物分子标记的精确性和可控性。水溶性修饰确保在缓冲体系中均匀分布，提高偶联效率及实验 reproducibility。

光学特性
TQ4WS-Alkyne 作为暗色猝灭剂，吸收范围宽广，能够与多种荧光供体兼容，显著抑制其发射信号，而自身不产生可检测荧光。宽吸收光谱使其在多种波长下均可实现高效猝灭，适合构建高灵敏度 FRET 探针或分子开关系统。水溶性结构保证其在生物缓冲体系中均匀分散，有助于标记效率和实验重复性。

主要是操作

FRET 探针构建
TQ4WS-Alkyne 可作为 FRET 系统中的高效受体猝灭剂，通过与荧光供体偶联，实现荧光信号的特异性调控。利用末端炔基的点击化学特性，可精确地将猝灭剂引入核酸、蛋白质或多肽链的特定位点，从而获得高灵敏度、低背景的荧光检测平台。

核酸和寡聚物标记
TQ4WS-Alkyne 可与含叠氮修饰的寡核苷酸或 DNA/RNA 片段通过 CuAAC 点击化学反应高效偶联。该方法操作简便，反应条件温和，可用于实时 PCR 探针、分子信标及荧光标记核酸检测，提高荧光信号的可靠性和实验 reproducibility。

蛋白质和多肽标记
末端炔基可与叠氮功能化的蛋白质、多肽或小分子进行选择性偶联。通过 FRET 或荧光开关设计，TQ4WS-Alkyne 可用于蛋白质-蛋白质相互作用研究、酶动力学分析及分子构象变化监测。水溶性修饰确保在缓冲液中的高效标记，且对蛋白质结构影响小。

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