CY5.5-sucrose,CY5.5标记蔗糖在反应过程中的注意事项
CY5.5-sucrose,CY5.5标示乳糖在体现时候中的注意力事宜
CY5.5-Sucrose 是将近红外荧光染料 CY5.5 与二糖蔗糖(Sucrose)通过化学修饰方式偶联而成的荧光标记碳水化合物探针。其应用于糖转运机制研究、植物营养动态可视化、糖受体识别、代谢成像等实验领域。该标记过程的核心在于保留蔗糖分子的识别与代谢活性,同时赋予其近红外可检测特性。CY5.5-sucrose 的反应机理具有一定的挑战性,因为蔗糖分子本身缺乏直接与染料发生共价偶联的反应官能团。
白砂糖是由 α-D-提子糖与 β-D-葡萄糖用 α(1→2) 糖苷键进行联系而成的非还原系统性二糖,分子式中只含悬浮醛基或酮基,且很多羟基团均为次级醇。但是,要与CY5.5变成共价进行联系,需机遇可不起作用的期间基团。其不起作用不可逆性通常情况划分为2步:白砂糖的特点化呈现与颜料偶联不起作用。乳糖实用工作化整修:为变现共价箭头,先要将乳糖原子建立可不起作用的胺基。经常用的方式方法也包括经过环氧防锈漆化物、羧酸纯化剂或酰氯类与乳糖的羟基不起作用,建立胺基团。列如可经过异氰酸酯或碳二亚胺氧化物(如EDC/NHS)将氨丙基胺联接至乳糖上,进而确立乳糖-胺其中体(Sucrose-NH₂)。其他常见的的方式方法是经过肟化或回归胺不起作用在蔗糖端突显一些胺实用工作基。颜料偶联反馈:将CY5.5-NHS酯与绵白糖胺研究物在偏碱水平下(pH 8.0–8.5)反馈,NHS酯与胺基出现亲核充当反馈,建立可靠的酰胺键,制成终的CY5.5-sucrose乙酰乙酸。该会出现生理反映研究进展的实际上是实现人工工资运用的胺性能团来“桥接”不极具会出现生理反映抗逆性的乳糖分子架构式与亲水性染料的抗逆性酯构成。由乳糖分子架构式构成中无特异位点,该掩盖通常会出现在某类边链羟基位点,会出现生理反映极具有一定区城暂时性,但无发齐全操控某一位点标上。反响整个过程中关注这最为关键的点:CY5.5-NHS 酯需到无水DMSO中现配所用,防范蛋白质水解;绵白糖-胺正化学原料药的准备可以脱盐纯化,事关化学反应不再溶物干扰信号;调控颜料与白砂糖胺的摩尔比(1.5:1至3:1)促进拿到集中化标示代谢物;终化合物可根据反相高效能色谱仪色谱(RP-HPLC)或质谱分享认可其色度与氧分子质理;近红外消化峰(CY5.5 λmax ~675 nm)可当为符号获得成功的信号灯。产品名称:CY5.5-sucrose,CY5.5标记符号乳糖
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