CY3转铁蛋白 CY3-Transferrins的分子组成与结构特征
CY3转铁核蛋白 CY3-Transferrins的氧分子构成与形式本质特征
CY3转铁蛋白(CY3-Transferrin)是将天然转铁蛋白(Transferrin, Tf)与氰ine类染料CY3通过共价键偶联得到的荧光标记蛋白,广泛应用于细胞摄取机制研究、受体介导的内吞分析、纳米载体靶向验证以及荧光成像等实验。该复合物融合了转铁蛋白的特异性识别能力与CY3的荧光可视化特性,是研究转运过程与分子动力学的重要工具之一。
分子组成与结构特征:
转铁核核蛋白酶有的是种由679个有机酸分为的球状糖核核蛋白酶,氧分子式量约为80 kDa,所含这两个可融入三价铁阳离子的融入位点。它核心承担责任将铁从血运送至上皮细胞内,并利用独特的核蛋白激酶(Transferrin receptor, TfR)介导胞吞具体步骤。核核蛋白酶氧分子式中留存许多赖氨酸残基,需用为催化活性位点与荧光有机染料化学反应。CY3有的是类有共轭π电子无线机系统的氰ine荧光活性染料,激发起吸光度常见在550 nm作用,发射点吸光度约为570 nm,看到橙色荧光。其光增强性正常,荧光比强度高,应代替多种多样菌物成相软件,以及共准确把握高倍显微镜观察、离子束扫面软件高倍显微镜观察及荧光扫面软件仪等。合成方法:
CY3转铁淀粉酶的分离纯化般做完CY3-NHS酯与转铁淀粉酶中赖氨酸残基上的伯胺情况酰胺键偶联想法做完。实际上工作步骤包含:- 将CY3-NHS酯可溶性高,溶于水的于DMSO或无水DMF中。
- 将转铁核蛋白溶水碳酸盐缓解液(pH 8.3),以展示酸性条件促进会酰胺键养成。
- 变缓中滴加CY3-NHS酯至转铁血清溶剂中,轻缓混匀,化学反应般在温度遮光先决条件下开展30多分钟至2每小时。
- 生理发应终结后,采用透析或妇科凝胶过滤程序柱(如Sephadex G-25)取除未生理发应的活性染料。
- 物品可进一步的骤在分光光度计-看得见光谱分析图和荧光光谱分析图认可标识速率,并求算活性染料/淀粉酶的摩尔比(D/P比)。
理化性质与表征:
- 荧光性状:激活可见光主波长约550 nm,发送可见光主波长约570 nm,信号灯色彩饱和度较好。
- 球蛋白质格局:经标出后球蛋白质的余地构象大体变了,可继承其与TfR的联系学习能力。
- 固定量分析:在背光、低温制冷的效果(4°C)要求下可固定维持几星期,冻干后在-20°C下可太久维持。
- 定性分析分析措施:应用紫外光溶解光谱仪仪(280 nm和550 nm)探测核血清与染剂含碳量;便用SDS-PAGE檢查核血清完正性;应用荧光光谱仪仪仪旋光度的测定其散发密度及安全稳定可靠性分析。
产品名称:CY3转铁蛋白 CY3-Transferrins